口腔鳞癌

摘要： 背景:肿瘤相关成纤维细胞系是构成肿瘤微环境的重要细胞成分,但是在原代培养过程中极易老化和表型丢失,进而显著降低肿瘤相关成纤维细胞功能相关研究的实验重复性.目的:旨在建立一种永生化的口腔癌相关成纤维细胞系,为探索口腔癌中肿瘤相关成纤维细胞功能提供稳定的细胞实验材料.方法:采用酶消化法分离、纯化人口腔癌组织来源肿瘤相关成纤维细胞,利用包装有人端粒酶反转录酶(pBABE-hygro-hTERT)的慢病毒感染原代肿瘤相关成纤维细胞,鉴定其形态及其标志物,然后进行细胞增殖、衰老功能检测,对原代和永生化肿瘤相关成纤维细胞进行染色体核型分析、细胞系身份鉴定.结果 与结论:①成纤维细胞永生化后,其标志物α-SMA、PDGFRβ以及FSP-1表达没有发现显著改变;②即使在传代15代后,永生化成纤维细胞的增殖速率明显优于非永生化成纤维细胞;③β-半乳糖苷酶染色结果显示:随着细胞代数增加,与非永生化成纤维细胞相比,永生化成纤维细胞未见明显衰老;④永生化成纤维细胞染色体核型仍保留正常细胞的基本特征,而未发生恶性转化;⑤短串联重复序列鉴定结果显示,永生化成纤维细胞为原代细胞,与已知细胞数据库信息均无重合;⑥以上结果说明,成功建立了口腔癌来源的永生化成纤维细胞系,为口腔癌肿瘤微环境研究提供进一步的实验基础.

摘要： 2021年11月8日,武汉大学化学与分子科学学院张先正教授和武汉大学口腔医院孙志军教授团队在《Nature Biomedical Engineering》上发表了题为Biomaterial-mediated modulation of oral microbiota synergizes with PD-1 blockade in mice with oral squamous cell carcinoma的研究论文,首次发现了口腔鳞癌中的消化链球菌具有促进免疫并抑制肿瘤的作用,并设计了含银纳米粒子黏膜粘附性水凝胶对口腔菌群调控以提升免疫治疗的效果,为PD-1抗体治疗口腔鳞状细胞癌过程中的低应答问题提出了部分解决方案。

摘要： 外泌体是由多种细胞分泌的30~100 nm不等的膜性微小细胞外囊泡,运载蛋白质、脂质和RNA等生物活性物质。外泌体可以从血清、尿液、唾液等许多体液中分离出来。外泌体内容物的多样性可以作为预测或监控疾病发展的信号。相比于其他体液,唾液有无创、易收集和易保存等优点。本综述总结了近年来针对唾液外泌体与口腔鳞癌(OSCC)及口腔潜在恶性疾病(OPMD)关系的研究成果,认为唾液外泌体检测在辅助OSCC和OPMD的早期筛查、诊断及跟踪方面具有可观的应用前景。

摘要： 目的:探讨Per1基因通过Wnt/β-catenin信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法:培养人口腔鳞癌细胞SCC-15,将si-Per1和si-NC转染至SCC-15细胞,作为si-Per1组和si-NC组。RT-qPCR检测细胞Per1基因表达水平,MTT检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot检测Ki-67、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、β-catenin蛋白表达。结果:与HOK组比较,Cal-27、SCC-4、SCC-15中Per1基因表达水平显著降低(P<0.05)。与癌旁组织比较,口腔鳞癌组织中Per1基因表达水平显著降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-Per1组OD值显著升高(P<0.05),Ki-67、CyclinD1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-Per1组侵袭、迁移细胞数显著升高(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.05)。与si-NC组比较,si-Per1组β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:Per1基因高表达,并通过Wnt/β-catenin信号通路可抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移。

摘要： 目的研究HOXC9基因对口腔鳞癌细胞系CAL-27生物学行为的影响。方法构建HOXC9过表达质粒载体,HOXC9过表达质粒转染CAL-27细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后细胞中HOXC9 mRNA表达水平,Western blotting检测转染后HOXC9蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测过表达HOXC9对细胞增殖能力的影响,克隆形成实验检测过表达HOXC9对细胞克隆形成能力的影响,划痕实验检测过表达HOXC9对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测过表达HOXC9对细胞侵袭能力的影响。结果与空载对照组相比,转染HOXC9过表达质粒后,细胞中HOXC9 mRNA表达水平明显升高(P0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的克隆形成能力(P<0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的迁移能力(P<0.05),过表达HOXC9可以促进CAL-27细胞的侵袭能力(P<0.001)。结论HOXC9可以增强人口腔鳞癌细胞克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力,在口腔鳞癌中可能起促癌因子的作用。

摘要： 目的研究趋化因子受体9(CC chemokine receptor 9,CCR9)及其配体趋化因子25(CC motif chemokine ligand 25,CCL25)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)转移中的作用。方法采用免疫组织化学染色检测CCR9和CCL25在OSCC肿瘤组织和癌旁组织中的表达和定位。细胞实验采用重组CCL25、CCR9抗体以及ERK1/2/P38抑制剂预处理OSCC细胞系(CAL27和SCC-9),通过免疫印迹和免疫荧光检测癌细胞株中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)和金属基质蛋白酶7(matrix metalloproteinase7,MMP7)的表达,同时检测细胞迁移和侵袭。结果伴有淋巴结转移的OSCC肿瘤组织中CCR9和CCL25的表达显著高于无转移组。细胞实验发现,CCR9/CCL25趋化因子轴通过ERK1/2/p38信号通路刺激VEGF-C和MMP7的表达,从而促进OSCC细胞迁移和侵袭。结论CCR9/CCL25趋化因子轴在促进OSCC转移中起重要作用,有望成为OSCC转移治疗的新靶点。

摘要： 目的:观察和分析全反式维甲酸(ATRA)联合阿帕替尼对口腔鳞癌细胞的增殖抑制作用。方法:实验分为对照组、ATRA组、阿帕替尼组及联合用药组,利用MTT法检测ATRA联合阿帕替尼对口腔鳞癌细胞CAL27及HN4增殖的影响;倒置显微镜观察两药联用对口腔鳞癌细胞形态的影响;利用实时定量RT-PCR法检测肿瘤细胞角蛋白KRT1、KRT10和干性相关基因及IGF1/IGF1R信号通路相关基因的表达水平。结果:ATRA、阿帕替尼单药使用均抑制肿瘤细胞增殖,两药联用组细胞增殖抑制率明显高于单药处理组(P<0.01),且两药联用在不同时间均对口腔鳞癌细胞增殖抑制作用呈现相加或协同作用。两药联用影响口腔鳞癌细胞的形态变化,上调KRT1、KRT10表达,促进其老化。两药联用抑制CAL27细胞肿瘤干性基因的表达,消除肿瘤细胞干性(P<0.05)。两药联用促进IGFBP3表达,抑制IGF1/IGF1R信号通路活性。结论:ATRA联合阿帕替尼通过促进细胞老化,影响细胞干性,抑制口腔鳞癌细胞增殖。

摘要： 目的探讨lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-1299抑制口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究。方法实验分为si-NC组、si-FOXD2-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-FOXD2-AS1组、miR-NC组、miR-1299组、anti-miR-NC+si-FOXD2-AS1组、anti-miR-1299+si-FOXD2-AS1组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncRNAFOXD2-AS1和miR-1299的表达水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告实验检测lncRNAFOXD2-AS1与miR-1299的靶向作用。Western blot法检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果口腔鳞癌细胞CAL27、SCC-090、HSC-3中lncRNAFOXD2-AS1表达水平显著升高,miR-1299表达水平显著降低(P<0.05)。lncRNAFOXD2-AS1低表达或miR-1299高表达均可抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。lncRNAFOXD2-AS1靶向调控miR-1299,低表达miR-1299可以逆转lncRNAFOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。lncRNAFOXD2-AS1低表达抑制β-catenin蛋白表达,而低表达miR-1299逆转了lncRNAFOXD2-AS1低表达对β-catenin蛋白表达的抑制作用。结论干扰lncRNAFOXD2-AS1表达可能通过上调miR-1299抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

摘要： 目的口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)及正常组织的差异表达谱进行全基因组分析。方法采用全基因组表达谱芯片检测3例OSCC及正常组织的转录本,确定OSCC的lncRNA和mRNA差异表达谱。通过构建差异表达基因的lncRNA-mRNA共表达网络,挖掘网络节点基因。利用GO及KEGG富集分析,探究差异表达lncRNA潜在的生物学功能。通过cis和trans调控角度,预测差异表达lncRNA潜在的靶基因。选取部分差异表达lncRNA,进行qRT-PCR验证。结果芯片筛选出差异表达lncRNA 2294条和mRNA 1938条;lncRNA TMPRSS11BNL、lnc-WRN-10∶1是共表达网络的节点基因;GO分析显示,差异表达mRNA富集度的前三GO term是interleukin-1 binding、response to interferon-alpha和establishment of epithelial cell apical/basal polarity;KEGG分析显示,差异表达mRNA主要富集在38种生物学途径,包括许多癌症相关通路;靶基因预测表明,1470条差异表达lncRNA具有cis或trans调控靶基因的潜能;qRT-PCR验证与芯片结果相一致。结论lncRNA在OSCC与正常组织中具有差异表达,节点lncRNA是OSCC发病的潜在关键基因。

摘要： 2021年11月8日,武汉大学化学与分子科学学院张先正教授和武汉大学口腔医院孙志军教授团队在《Nature Biomedical Engineering》上发表了题为Biomaterial-mediated modulation of oral microbiota synergizes with PD-1 blockade in mice with oral squamous cell carcinoma的研究论文,首次发现了口腔鳞癌中的消化链球菌具有促进免疫并抑制肿瘤的作用,并设计了含银纳米粒子黏膜粘附性水凝胶对口腔菌群调控以提升免疫治疗的效果,为PD-1抗体治疗口腔鳞状细胞癌过程中的低应答问题提出了部分解决方案。该工作第一作者为武汉大学化学与分子科学学院郑迪威博士和武汉大学口腔医院邓伟伟博士。

摘要： 目的：常伴有锌指蛋白750(ZNF750)的缺失突变,其缺失突变与鳞状上皮恶性生物学特征相关,本课题主要探索ZNF750调控肿瘤血管微环境促进血管正常化,进而抑制肿瘤恶性进展的机制. 方法：Western-blot法检测血管生成因子ANG、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、脯氨酰羟化酶2(PHD2)及G蛋白信号调节蛋白5(RGS5)的表达,qPCR法检测血小板衍生因子PDGFB及肿瘤血管标志物CD105(Endoglin)mRNA的变化.CCK-8法及细胞划痕实验分别研究过表达ZNF750对三种口腔鳞癌细胞株的增殖及迁移能力的影响; 结果：ZNF750可有效降低ANG、VEGF、RGS5、CD105mRNA或蛋白的表达,而促进PHD2、PDGFB蛋白或mRNA的表达;过表达ZNF750使三株口腔鳞癌细胞的增殖及迁移能力均降低; 结论：ZNF750可调控肿瘤血管微环境的变化促进血管正常化,进而抑制口腔鳞癌细胞的恶性进展.

摘要： 探讨微小核糖核酸-626(miR-626)和微小核糖核酸-5100(miR-5100)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况,及两者在OSCC诊断及预后判断中的临床价值.

摘要： 研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响,初步探讨CAFs在口腔鳞癌发生发展中的作用.

摘要： 本课题主要通过研究miR-30家族,特别是miR-30e在口腔鳞癌增殖和侵袭中的所起作用,初步明确其作用机制.为口腔鳞癌早期诊断提供的潜在的生物标志物.

摘要： 本研究通过建立口腔鳞癌局部骨侵袭动物模型及破骨细胞体外培养对口腔鳞癌骨侵袭进程中的不同种破骨细胞进行表型分析及功能研究.

摘要： 探讨LncRNA H19遗传变异与中国人群口腔鳞癌遗传易感性的关联,筛选出H19中潜在功能的SNPs并探索其可能的生物学机制.

摘要： 探讨WDR5在口腔鳞癌临床标本中的表达及其临床意义;探索WDR5干扰后对体外肿瘤细胞系表型的影响,从而为抗肿瘤治疗提供新的靶点和理论基础.

摘要： Krüppel样转录因子家族（KLF）是一组调节基因表达的锌指DNA结合蛋白，该蛋白质的锌指负责与富含鸟嘌呤的核心启动子元件的特异性DNA结合。中枢区域可能参与激活或翻译后调控途径，酸性N末端结构域可能在转录激活过程中起重要作用。在哺乳动物中，KLF家族中有17个基因。还有9种相关的蛋白质组成SP1亚家族。转录因子SP1至SP9与KLF类似，但其锌指更靠近蛋白质中间而不是C-末端。KLF6是KLF家族转录因子的成员，中枢区域可能参与激活或翻译后调控途径，酸性N末端结构域可能在转录激活过程中起重要作用，能够在同源或异源启动子上激活约4倍的转录效能。该蛋白同时具有调节细胞增殖，分化，凋亡和血管生成的功能。据文献报道，KLF-6在多种恶性肿瘤中呈低表达，被认为是潜在的抑癌基因。本实验旨在检测Klf-6在口腔鳞癌组织中的表达，探讨其是否可以通过上调Klf-6的表达，从而抑制口腔鳞癌的增殖，迁移和侵袭。

摘要： 口腔鳞癌患者五年生存率仅约50%，复发及转移是其预后不良的主要原因。酸性微环境在肿瘤转移中起重要作用，但肿瘤细胞如何感知和传递微环境酸信号尚不明确。近期研究发现，肿瘤源性外泌体可携带肿瘤细胞核酸、蛋白等大分子信息物质，并随体液运输至淋巴结或远处靶位点，影响受体细胞功能。本研究拟探索酸性微环境下口腔鳞癌细胞外泌体对其自身侵袭和转移能力的影响。

摘要： 探讨天然多克隆抗癌抗体对口腔癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移的影响及其意义.利用ELISA方法得到正常人血液中的天然抗体,分别作用于SCC-15和CAL-27两种细胞系48h,镜下观察天然抗体对口腔癌细胞形态的影响,采用CCK-8实验观察天然抗癌抗体对口腔癌细胞增殖的影响,流式细胞仪法检测对口腔癌细胞凋亡情况的影响,Transwell实验检测对口腔癌细胞侵袭转移的影响,Western Blot实验检测口腔癌细胞中EMT相关因子的表达情况.

摘要： 本发明公开了生物标志物在评估口腔鳞癌危险程度中的应用，所述生物标志物为GSDMA，通过对不同分化等级的口腔鳞癌的样本进行检测，发现所述生物标志物在不同危险程度的癌样本中呈现显著性差异，提示可以将GSDMA应用于口腔鳞癌的分级判断，进而指导医生对不同进程的口腔鳞癌采用的不同的治疗手段，提高治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种与口腔鳞癌相关的生物标志物，所述生物标志物选自RP13‑297E16.4和/或C20orf197，实验证明RP13‑297E16.4和C20orf197在口腔鳞癌中呈现显著性上调，其具有较高的AUC值，说明将RP13‑297E16.4和/或C20orf197应用于口腔鳞癌的诊断具有较高的准确性。

摘要： 本发明公开了基因在评估口腔鳞癌中的应用，具体的涉及基因AC108142.1或LINC01160，通过对癌样本和对照样本进行检测，发现AC108142.1或LINC01160在两组中呈现显著性差异，且应用于口腔鳞癌的诊断具有较高的敏感性、特异性和准确性。

摘要： 本发明公开了ARRDC2在评估口腔鳞癌发展进程中的应用，本发明通过高通量测序以及生物信息学分析，筛选到在肿瘤不同发展进程中表达显著变化的基因ARRDC2，提示可将ARRDC2作为分子标志物应用于口腔鳞癌发展进程的判断，精确、客观预测肿瘤预后、指导治疗方案的制定和疗效监测。

摘要： 本发明公开了与口腔鳞癌发生发展相关的生物标志物及其在诊疗中的应用，所述生物标志物为RP11‑588H23.3，或RP11‑588H23.3与AC108142.1或RP13‑297E16.4的组合，本发明的生物标志物应用于口腔鳞癌的诊断具有较高的准确性、敏感性和特异性。

摘要： 本发明公开了口腔鳞癌生物标志物及其应用，所述生物标志物为RP11‑733O18.1，或RP11‑733O18.1与AC108142.1或RP13‑297E16.4的组合，本发明公开了生物标志物在制备诊断口腔鳞癌的产品中的应用；本发明同时公开了生物标志物在制备治疗口腔鳞癌的药物组合物中的应用。

摘要： 本发明公开了一种lncRNA在诊断和治疗口腔鳞癌中的应用，所述lncRNA为IGF2BP2‑AS1。在本发明的具体实施例中，通过对口腔鳞癌组织和癌旁组织样本进行检测，发现IGF2BP2‑AS1在口腔鳞癌组织中显著高表达。本发明同时公开了一种筛选口腔鳞癌的候选药物的方法。

摘要： 本发明公开了一种与口腔鳞癌分化等级相关的生物标志物，该生物标志物为NUDT6，实验证明，NUDT6在口腔鳞癌不同分化程度的组织中呈现显著性差异，基于此，可以将NUDT6应用于口腔鳞癌的分化程度的判断。从而指导医生对危险度高中低不同的口腔鳞癌患者采取不同的治疗策略，提高治疗效果。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种与口腔鳞癌细胞生长相关的标志物及其应用。本发明公开了纤维调节蛋白作为与口腔鳞癌细胞生长相关的标志物及其应用，其中纤维调节蛋白在标识口腔鳞癌细胞生长状况方面的应用包括：一种口腔鳞癌的检测试剂盒；抑制纤维调节蛋白表达的组合物在制备抑制口腔鳞癌细胞增殖的药物中的应用；抑制纤维调节蛋白表达的组合物在制备抑制口腔鳞癌细胞迁移的药物中的应用；抑制纤维调节蛋白表达的组合物在制备抑制口腔鳞癌细胞侵袭的药物中的应用。本发明公开了纤维调节蛋白的表达水平与口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭密切相关，纤维调节蛋白作为标志物为口腔鳞癌的检测诊断、治疗和预后判断提供新的手段。

摘要： 本发明属于肿瘤治疗用纳米药物制备领域，提供了一种能治疗口腔鳞癌的金‑铂复杂手性纳米粒子的制备方法，包括：将一定量的氯金酸、氯铂酸溶解于溶剂中，低温反应，加入碳基纳米催化剂，均匀搅拌并保温。加入的阳离子表面活性剂，中温反应。采用微流控技术逐滴加入手性修饰诱导剂，高温反应。洗涤并干燥反应沉淀。本发明工艺简单，产率高，易实现工业化大批量生产。本发明制备的手性纳米粒子粒径为0.1～1微米，表面具有牡丹花样的外形紫外灯激发下发出红色的荧光。主要依靠手性复杂纳米粒子的手性诱导选择效应以及动态手性螯合金属调控凋亡机制实现多种口腔鳞癌细胞的杀灭作用，是一种新型的口腔鳞癌治疗纳米技术。