混伪品

摘要： 目的:建立一种地骨皮及其混伪品的红外指纹图谱鉴别方法。方法:采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)分析地骨皮及混伪品的红外光谱特征,利用共有峰率和变异峰率的双指标序列分析其亲缘关系。结果:正品地骨皮在4000~400 cm^(-1)范围内有14个共有峰,共有峰率≥82.3%,变异峰率≤14.3%,亲缘关系很近。混伪品与正品间的共有峰减少,并产生新的吸收峰,共有峰率≤77.5%,变异峰率≥15.4%。结论:本文明确了地骨皮正品的红外共有峰模式,得到了可计量的共有峰率和变异峰率双指标序列分析样品间的亲缘关系。

摘要： 通过文献调研,对延胡索名称、基原、功效、道地产区及混伪品进行考证,得知其名称大致经历从“延胡”“延胡索”“滴金卵”“玄胡索”到“元胡”的过程,最后正名为“延胡索(元胡)”;延胡索基原为罂粟科植物延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang)的干燥块茎;延胡索功效始载于《雷公炮炙论》,记载有止痛的功效,经历代本草补充修正,现认为其具有活血、行气、止痛等功效,用于胸胁、脘腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻等病症;延胡索道地产区自五代起为今辽宁、内蒙古、河北三省交界处,明朝产地逐渐转移至江苏等地,清朝开始延胡索的种植从江苏西南部的茅山地区扩展到浙江杭州一带,现以浙江东阳、浙江磐安等地的延胡索为最佳;延胡索主要混伪品有半夏、零余子、夏天无等。该研究为延胡索正本清源,为其资源开发利用提供参考依据。

摘要： 通过查阅本草文献,对玄参名称、基原、功效、道地产区和混伪品5个方面进行考证,得知其名称大致经历从“元参”“玄参”及别称“重台”“鹿肠”“正马”等过程,最后统一正名为“玄参”;历代本草记载玄参基原为玄参科植物玄参(Scrophularia ningpoensis)的干燥根,古今记载基原基本一致;玄参功效自《神农本草经》记载具有清热凉血、补肾气、明目等作用,经历代本草补充修正,现认为其具有清热凉血、滋阴降火、解毒散结的功效;玄参道地产区自汉时起为山东菏泽与河北沧州,明清时产地开始南移至江西、湖南、浙江等地,新中国成立后以浙江省为主向西南扩散,以浙江磐安为佳;玄参主要混伪品为草乌。

摘要： 目的:对白术及几种菊科混伪品进行比较研究,为白术鉴别与质量控制提供有效方法。方法:采用性状及显微鉴别方法对白术及混伪品进行观察,并建立高效液相色谱指纹图谱方法,使用Agilent Eclipse Plus C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱;以0.05%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;柱温25°C;检测波长232 nm;流速1 mL·min-1;进样体积:10μL,对药材进行分析;采用液质联用技术对共有峰进行鉴定,结合相似度评价区分白术及混伪品。结果:白术和混伪品被成功鉴别,所建指纹图谱可正确区分白术与混伪品。结论:综合传统鉴别手段与建立的指纹图谱方法,可直观、多层次地甄别白术与混伪品间的差异,为白术的准确鉴定和质量控制提供可靠方法。

摘要： 目的:对白及与其常见混伪品小白及、山慈菇、玉竹和黄精进行比较鉴别,为保障其用药安全性和有效性提供依据。方法:基于白及与其4种混伪品的粉末、水浸液和乙醇提取液,用理化鉴定的方法对其进行鉴别。结果:白及与其4种常见混伪品在理化特征上有显著的差异,可以通过碱性酒石酸铜、茚三酮等反应进行鉴别,且碱性酒石酸铜反应效果最好。结论:理化鉴定可以较为准确的区分白及与其常见混伪品。

摘要： 采用红外光谱法结合二阶导数光谱法对地骨皮及混伪品的红外光谱特征进行分析与鉴定。地骨皮正品的一维和二阶导数指纹图谱分别有14个和34个共有峰。混伪品与正品间的共有峰减少,并产生新的吸收峰。本文明确了地骨皮正品的一维和二阶导数红外共有峰模式,找到了地骨皮正品与混伪品的红外指纹图谱区别特征。本法具有准确、简便、直观等优点,适合地骨皮及混伪品的鉴别与区分。

摘要： 目的建立指纹图谱和3个有效成分含量测定的方法快速筛查苍术混伪品,为苍术药材及饮片的监督检验奠定基础。方法建立58批苍术样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,同时测定β-桉叶醇、苍术素、苍术酮的含量,通过计算指纹图谱相似度结合含量测定比值建立筛查苍术混伪品的方法,并对200批苍术国家抽检样品进行检查。结果192批苍术饮片指纹图谱相似度>0.90,苍术酮/苍术素含量比值200,判断为苍术混伪品。结论该方法灵敏准确,可快速筛查出苍术混伪品,可为苍术药材及饮片质量监管提供有力技术支撑。

摘要： 目的建立金线莲高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱分析方法,基于化学计量学对比区分其7种常见混伪品(台湾银线兰、长片金线兰、滇越金线兰、丽蕾金线兰、血叶兰、斑叶兰、虎耳草),为其真伪鉴别提供技术参考。方法采用Welch Ultimate XB-C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱60 min,流速1.0 mL·min-1,柱温30°C,检测波长360 nm,进样量10μL。建立17批金线莲的指纹图谱,通过聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least square-discriminate analysis,OPLS-DA)用于区分台湾银线兰、长片金线兰、滇越金线兰、丽蕾金线兰、血叶兰、斑叶兰、虎耳草共7种混伪品。结果建立了金线莲高效液相色谱指纹图谱,确定了16个共有峰(指认11个成分:槲皮素3,7-二葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷-7-O葡萄糖苷、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、紫云英苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素),17批金线莲与对照指纹图谱的相似度均>0.85,7种混伪品与金线莲对照指纹图谱的相似度均<0.8,通过正交偏最小二乘判别分析筛选出金线莲与混伪品的差异标志物为水仙苷,对差异标志物进行含量验证,金线莲中水仙苷含量(高于1098.09μg·g-1)显著高于其混伪品(低于379.96μg·g-1)。结论高效液相色谱指纹图谱的方法简单、可靠,可用于金线莲与混伪品的区分,水仙苷可以作为区分混伪品的标志物之一。

摘要： 目的 建立金线莲高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱分析方法,基于化学计量学对比区分其7种常见混伪品(台湾银线兰、长片金线兰、滇越金线兰、丽蕾金线兰、血叶兰、斑叶兰、虎耳草),为其真伪鉴别提供技术参考.方法 采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1％甲酸水(B),梯度洗脱60 min,流速1.0 mL·min-1,柱温30°C,检测波长360 nm,进样量10μL.建立17批金线莲的指纹图谱,通过聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least square-discriminate analysis,OPLS-DA)用于区分台湾银线兰、长片金线兰、滇越金线兰、丽蕾金线兰、血叶兰、斑叶兰、虎耳草共7种混伪品.结果 建立了金线莲高效液相色谱指纹图谱,确定了16个共有峰(指认11个成分:槲皮素3,7-二葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷-7-O葡萄糖苷、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷、紫云英苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素),17批金线莲与对照指纹图谱的相似度均>0.85,7种混伪品与金线莲对照指纹图谱的相似度均<0.8,通过正交偏最小二乘判别分析筛选出金线莲与混伪品的差异标志物为水仙苷,对差异标志物进行含量验证,金线莲中水仙苷含量(高于1098.09μg·g-1)显著高于其混伪品(低于379.96μg·g-1).结论 高效液相色谱指纹图谱的方法简单、可靠,可用于金线莲与混伪品的区分,水仙苷可以作为区分混伪品的标志物之一.

摘要： 目的:端午药市是一年一度的药膳药材盛会,“大芦山当归”是普洱地区有名的药膳药材.方法:本文从普洱药材市场中收集24份“当归”药材,采用石蜡切片法制成永久装片,用CaseViewer来观察和测量“当归”药材的归头、归身、归尾的木栓层、皮层、韧皮部、木质部的厚度和油室的大小、面积、数量以及分泌细胞的数量.结果:8种当归药材均有双子叶植物根的基本构造,即从外至内有木栓层、皮层、韧皮部和木质部组成,均有油室的分布,部分种有树脂道的分布.结论:8种“归”药材横切面结构相似,但是其显微数量水平差异显著,因此可以从木栓层厚度、韧皮部厚度、木质部厚度、油室面积4个指标的显微数据的差异水平鉴别8种当归药材.

摘要： 目的:分析中药菟丝子及其杂质的核基因组ITS2序列,对中药菟丝子正品基原进行分子鉴别.方法:采用DNA条形码技术,对中药材菟丝子及其常见混伪品的基原植物及药材共79份样品进行研究.通过菟丝子及其杂质的ITS2序列,MEGA6.0软件分析,寻找差异位点,构建系统发育树.结果:利用ITS2序列构建的邻接(NJ)树表明菟丝子、南方菟丝子及其混伪品可明显区分,并呈现出良好的单系性.结论:DNA条形码可对中药菟丝子及其混伪品准确鉴定,有助于菟丝子药材的监管及市场流通.

摘要： 目的：建立一种快速、高效的鉴别金钱白花蛇(银环蛇)与三种常见混伪品的多重PCR方法. 方法：采用动物DNA提取试剂盒提取金钱白花蛇、赤链蛇、赤链华游蛇与金环蛇DNA;根据各样品COI(动物线粒体细胞色素b基因)序列设计4对不同长度的特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系,通过电泳检测扩增产物分子量差异实现4种蛇类的快速鉴别. 结果：针对金钱白花蛇、赤链蛇、赤链华游蛇与金环蛇所设计的4对引物分别扩增出136、195、244和315bp的目的条带;每对引物特异性扩增,灵敏度为皮克级. 结论：本实验首次建立了金钱白花蛇与常见三种相似混伪品的多重PCR方法.此方法特异性高,为多重PCR技术体系在中药材金钱白花蛇的快速检测提供参考.

摘要： 目的：对中药茜草及混伪品进行DNA条形码分子鉴定研究.rn 方法：应用psbA-trnH、matK和rbcL序列,对茜草及其混伪品共13个物种270条序列样本采用MEGA5.1进行种内及种间变异,K2P遗传距离分析,并构建系统发育树.rn 结果：91份茜草及其混伪品样品的DNA提取效率为100％,psbA-trnH、matK和rbcL扩增及测序成功率分别为100％、89％、93％.单个序列能对茜草与不同属的混伪品成功区分,但不能与茜草属其他物种的区分开.对psbA-trnH+matK、pbsA-trnH+rbcL,matK+rbc和psbA-trnH+matK+rbcL4个组合片段鉴定效率进行比较,psbA-trnH+matK+rbcL组合序列鉴定效果最好.茜草psbA-trnH+matK+rbcL组合序列种内最大遗传距离为0.0014,种间最小遗传距离分别为0.0007;NJ树中茜草能与茜草属8个物种以及混伪品紫金牛、丹参、川赤芍、蓬子菜明显的区分;对市场上购买的15份茜草药材进行鉴定,其中6份样品能成功扩增3个基因片段,采用NJ树分析,其中4份样品与茜草聚为一支,另外两个样品各聚为单独一支,为茜草属其它物种.rn 结论：使用psbA-trnH+matK+rbcL组合序列可以对茜草及其混伪品的进行鉴别.

摘要： 本研究分析青天葵及其混伪品matK序列,以期在分子水平建立青天葵及其混伪品的鉴别方法.采用一对通用引物对matK基因进行PCR扩增并测序,所得序列用DNAMAN、MEGA等软件进行分析.获得青天葵及其混伪品的matK基因序列长度为587 bp,平均GC含量为32.8％.青天葵种内遗传距离为0.000,与混伪品种间遗传距离范围为0.016至0.375.基于matK基因序列构建的NJ聚类树能明显地区别青天葵及其混伪品,因此应用matK基因序列可以有效鉴别青天葵及其混伪品.

摘要： 目的:rn 对中药茜草及混伪品进行DNA条形码分子鉴定.rn 方法:rn 应用psbA-trnH、ma tK和rbcL序列,通过PCR扩增并进行双向测序,构建系统进化树,对96份茜草及其混伪品样本进行鉴定.rn 结果:rn 实验表示psbA-trnH、matK和rbcL的扩增分别为100％ 、89％、93％.对基因片段psbA-trnH、matK和rbcL进行组合,得到了psbA-trnH+matK、pbsA-tenH+rbcL,matK+rbcL和psbA-trnH+matK+rbcL 4个组合片段,psbA-trn(ll) +matK+rbcL组合序列,构建系统NJ进化树,中国茜草、膜叶茜草、东南茜草、卵叶茜草、峨眉茜草、金剑草、披针叶茜草和长叶茜草,以及混伪品紫金牛、丹参、川赤芍、蓬子菜、均能够和茜草做很好的区分.rn 结论:rn psbA-trnH+matK+rbcL组合序列能对茜草及其混伪品进行鉴定,为茜草属的候选DNA条形码.

摘要： 目的:对中药材重楼及其易混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效.方法:对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列用Clustal W软件进行多重排定.序列变异位点采用PAUP 4.0b10进行统计分析,并构建MP(最大简约法)树.结果:序列比对图中显示重楼与其伪品序列存在明显差异,从构建的系统发育树显示重楼的不同来源样本聚在一支能很好与易混伪品区分.结论:ITS作为DNA条形码序列能够有效的将中药材重楼与其伪品区别开,但对于其亲缘关系近的易混品不能很好的区分,需要借助其他的分析工具.

摘要： 目的:对中药材重楼及其易混伪品进行分子鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效.方法:对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列用Clustal W软件进行多重排定.序列变异位点采用PAUP4.0b10进行统计分析,并构建MP(最大简约法)树.结果:序列比对图中显示重楼与其伪品序列存在明显差异,从构建的系统发育树显示重楼的不同来源样本聚在一支能很好与易混伪品区分.结论:ITS作为DNA条形码序列能够有效的将中药材重楼与其伪品区别开,但对于其亲缘关系近的易混品不能很好的区分,需要借助其他的分析工具.

摘要： 目的:建立太子参的SCAR标记,为太子参分子鉴定提供科学依据.方法:用随机引物进行RAPD筛选,获取特异的RAPD标记条带,分离提取RAPD标记条带,进行测序,根据测定RAPD标记条带的两端序列设计1对特异引物进行常规PCR反应,获得SCA标记.结果:根据RAPD标记条带的序列设计筛选了1对特异引物,分别对15个来自不同产地的太子参样本和7个混伪品的DNA进行SCAR扩增,太子参均能扩增出1条相应于RAPD标记的特异性条带,而混伪品均不能扩增出此条带.结论:建立RAPD-SCAR标记,可作为太子参与混伪品分子鉴定的依据.

摘要： 目的: 通过比较中药材柴胡及其混伪品之间的ITS2序列的差异及其规律,为柴胡及其混伪品的鉴定提供分子依据。rn 方法:分析2科3属9个物种33份柴胡及其混淆品物种的ITS2序列长度、变异位点、G+C 含量并构建系统发育树（NJ）。rn 结果：分析得知柴胡及其混伪品的ITS2全序列长度范围为215 bp-244bp,G+C 含量范围为53.95% - 63.52%，序列比对后长度为264bp,共有132变异位点。rn 结论: ITS2可有效地鉴别中药材柴胡及其混淆品,可以作为柴胡与其混伪品之间的分子鉴定方法之一。

摘要： 为准确鉴别藏药独一味及其混伪品,该研究应用ITS2条形码对43份药材及其混伪品进行鉴定研究.通过对样本进行基因组DNA提取,PCR扩增和双向测序获得ITS2序列.所得序列经CodonCode Aligner拼接后,基于隐马尔可夫模型的HMMer注释方法去除两端5.8S和28S区段,用软件MEGA5.0对序列进行分析比对,并基于K2P模型进行遗传距离分析.采用相似性搜索法、最近距离法、构建NJ树对序列鉴定能力进行评估.结果表明,药材基原物种独一味的ITS2序列种内最大K2P遗传距离均远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离;应用相似性搜索法分析结果表明ITS2序列可准确鉴定独一味药材及其混伪品;NJ树显示独一味药材与其混伪品可明显区分开,表现出良好的单系性.因此,应用ITS2条形码可稳定、准确地鉴别独一味药材及其混伪品.

摘要： 本发明公开了一种用于鉴别当归与混伪品东当归的方法，具体方法是采用了色谱与质谱相联用的技术而建立，最终确立了两者的专属性鉴别检测指标，亦即：当归中藁本内酯：蛇床子素的信号/噪音，亦即S/N比值大于1，混伪品东当归中藁本内酯：蛇床子素的S/N比值小于1。该方法能够较为准确、快速鉴别当归与混伪品东当归，为中药当归的用药安全提供一种科学、有效的技术鉴别手段。

摘要： 本发明属于DNA分子检测技术领域，具体地说，涉及一种中药材混伪品假升麻的LAMP检测引物组、试剂盒及LAMP检测方法。一种鉴别升麻混伪品的LAMP检测引物组，包括3组特异性引物，分别为正向内引物FIP和正向外引物FIP；反向内引物F3和反向外引物B3；正向环引物LF和反向环引物LB，其分别具有如SEQ ID No.1至SEQ ID No.6所示的序列。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增，可用于升麻药材的高灵敏度快速检测，能够在初期的药材原材料交易到后期的中成药生产整个流通环节对药材基原物种进行检测。本发明为保障升麻药材的用药疗效提供了新的技术手段。

摘要： 本发明公开了当归特异引物对、PCR‑RFLP试剂、PCR‑RFLP试剂盒和PCR‑RFLP检测方法。该当归特异引物对由核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的单链DNA分子和核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的单链DNA分子组成。PCR‑RFLP所用酶为限制性核酸内切酶SmlI。该PCR‑RFLP方法不仅可以检测当归植株、当归药材，还能准确检测中药配方颗粒中是否含有当归。鉴定方法准确、快捷，在鉴别当归与常见当归混伪品方面具有更高的特异性。

摘要： 本发明公开了用于鉴别木通及其两种混伪品的微滴数字PCR方法及应用。基于木通及其常见混伪品关木通和川木通的ITS2序列分别设计特异性引物和TaqMan探针，开发单重和三重微滴数字PCR技术。单重微滴数字PCR技术能够分别特异性检测木通、川木通和关木通，三重微滴数字PCR技术可以一次性在同一PCR反应体系中同时检测三种药材，不同引物组之间没有相互干扰，可用于市售木通药材及相关中成药检测。所述特异性引物和TaqMan探针为SEQ ID No.1‑9所示序列。该方法特异性强，灵敏度高，适用于痕量DNA的检测，可为中药质量控制和市场监管提供依据，保证中药安全性及有效性。

摘要： 本发明提供一种基于熔解曲线分析的前胡及其混伪品的检测鉴定方法，包括以下步骤：提取前胡及其混伪品的总基因组DNA；对样本中的总基因组DNA进行PCR扩增；建立前胡正品、不同种类的前胡伪品样本及二者不同比例掺杂的熔解曲线模型；待测样本的快速检测，判断待测样品的真伪。本发明准确性高、特异性好、检测速度快，直观性强，通过进行熔解曲线Tm值大小的比对即可区分不同前胡样品的DNA，在该药材的正品、伪品及二者掺杂的掺伪品的快速检测方面具有独特的优势。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴别重楼品种及其混伪品的引物对、试剂盒和检测方法，包含1～4对引物，引物对选自：SED ID NO.1‑2所示的引物对1，SED ID NO.3‑4所示的引物对2，SED ID NO.5‑6所示的引物对3，SED ID NO.7‑8所示的引物对4；引物对1、2、3、4分别用于鉴别目标重楼品种滇重楼、华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼。鉴别方法包括步骤：1)提取待测样品的基因组DNA；2)采用的引物对或者的试剂盒，对提取的基因组DNA进行PCR扩增，不同的引物对分管扩增；3)检测PCR扩增产物中是否含有目的扩增片段，含有目的扩增片段的样品鉴别为目标品种阳性。

摘要： 本发明公开了一种鸡骨草正品及其混伪品毛鸡骨草和相思子的PCR鉴别方法，具体包括模板DNA提取、PCR扩增反应、琼脂糖电泳检测三个步骤。本发明通过找出特异性DNA片段，设计出特异性引物，通过PCR技术扩增出特异性片段，通过聚合酶链式反应(PCR)技术实现了对鸡骨草正品及其混伪品毛鸡骨草和相思子的高效鉴别。本发明提供的方法简单易行，稳定可靠，采用该方法能够快速准确的对鸡骨草正品及其混伪品毛鸡骨草和相思子进行真伪鉴定，确保用药安全，有助于实现鸡骨草药材市场的健康发展。

摘要： 本发明公开了一种鉴别火把花根与其混伪品的引物及方法，包括有引物对ITS2F和ITS3R，其中正向引物ITS2F的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，反向引物ITS3R的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；通过分别提取火把花根与其混伪品的基因组DNA；分别以提取的取火把花根与其混伪品的基因组DNA为扩增模板，以引物对ITS2F和ITS3R作为引物，进行PCR扩增，分别得到取火把花根与其混伪品的扩增产物；将所得的各测序峰图利用CodonCode Aligner V 6.0.2软件并基于隐马尔夫模型的HMMer注释方法获得火把花根与其混伪品的内部转录间隔区ITS2序列从而分别绘测出火把花根与其混伪品的ITS2二级结构，通过对比火把花根与其混伪品的ITS2二级结构快速准确地鉴别出火把花根与其混伪品。

摘要： 本发明公开了一种DNA水平快速鉴定地肤子与其混伪品的方法，包括如下步骤：1)提取样品地肤子DNA；2)以待测样品DNA为模板，PCR扩增ITS2序列的片段；3)将PCR产物正向测序，经过ITS2 database剪切获得地肤子ITS2序列；4)进行NJ系统发育树构建、种内及种间平均遗传距离分析、二级结构特征比较。结果表明地肤子ITS2序列聚类成一支独立进化枝，地肤子种内平均遗传距离显著小于地肤子与其混伪品种间平均遗传距离，且地肤子ITS2二级结构与混伪品的差异明显，说明ITS2序列作为快速准确鉴定地肤子与其混伪品。本发明方法操作简单、分辨率高，客观性、适用性和重复性强，能够实现可快速准确鉴定地肤子与其混伪品。

摘要： 本发明公开了一种鉴别中药材何首乌及其混伪品的环介导等温扩增引物组及方法、试剂盒与应用，本发明首次使用LAMP检测方法鉴别何首乌及其混伪品，克服了现有技术中因为何首乌与其他何首乌属的基因序列非常相似，如trnL‑trnF的变异区间较小，ITS2和matK序列重叠度高，较难找到LAMP技术鉴定的特异性基因序列和特异引物的技术难题。