Ezrin

摘要： 肿瘤转移是肿瘤恶化及死亡的主要原因,近年来研究发现,许多microRNA(miR)、蛋白分子、细胞信号转导通路等均可介导肿瘤迁移侵袭。Ezrin蛋白又称细胞绒毛蛋白,属埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(Ezrin/Radixin/Moesin,ERM)家族最早发现的一员,广泛分布于人体细胞内,是细胞骨架与细胞膜之间的连接蛋白,参与许多复杂的细胞生命活动。Ezrin作为近年来肿瘤转移相关研究的热点分子,可通过不同机制促进肌动蛋白的重新组装及肿瘤细胞间的起泡内吞影响肿瘤细胞运动,不仅影响肿瘤细胞转移的某一阶段,还可通过多种途径影响不同肿瘤及肿瘤转移的不同阶段。因此,Ezrin是肿瘤转移过程中的重要分子,也是肿瘤诊疗的创新靶点。本文对Ezrin的生物学结构及功能进行简要介绍,并对Ezrin影响多种肿瘤细胞转移途径做一概括和总结。

摘要： 目的:研究半枝莲石油醚提取物对EGF诱导的人三阴性乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)Ezrin和RhoA蛋白表达的影响,探讨其抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、分化的作用机制。方法:溶剂萃取法获得半枝莲石油醚提取物,通过Agilent HPLC-ESI-Q-TOF-MS MassHunter软件分析,于PubChem数据库中获取半枝莲石油醚提取物熊果酸的分子对接信息。采用分子对接技术对半枝莲石油醚提取物中熊果酸与RhoA蛋白受体的对接进行可视化分析。为探讨其抑制肿瘤细胞的分化、增殖机制,取对数生长期细胞分为7组,用含2%胎牛血清培养液进行饥饿培养24 h,给予30 ng/mL EGF分别干预30 min、24 h后,分别给予相应药物培养30 min,采用Western blotting法检测各组MDA-MB-231细胞中RhoA、p-RhoA及Ezrin蛋白表达情况。结果:质谱分析显示,半枝莲石油醚提取物中主要包括长链脂肪酸和萜类成分。生物信息分子对接发现,熊果酸是半枝莲调控RhoA的有效活性成分。Western blotting结果显示,EGF诱导MDA-MB-231细胞30 min及24 h后p-RhoA和Ezrin蛋白相对表达量均明显升高(P0.05)。EGF可能以RhoA蛋白磷酸化的形式参与下游蛋白信号调控,增强肿瘤癌细胞中Ezrin蛋白表达,进而促进癌细胞侵袭和转移。结论:熊果酸是半枝莲调控RhoA的有效活性成分。半枝莲石油醚提取物可通过RhoA信号通路抑制MDA-MB-231细胞的增殖、转移和分化,进而对人三阴性乳腺癌起到治疗作用。

摘要： 目的 探讨黄芩素(BAI)通过Ezrin相关信号转导通路影响喉癌细胞迁移、侵袭的机制.方法 BAI作用于体外培养的喉癌Hep-2细胞,分别培养24、48、72 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测增殖抑制作用;分别培养24、48 h,划痕愈合实验检测对细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测对细胞侵袭能力的影响;荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测对Ezrin、RhoA基因mRNA表达的影响;Western印迹检测对p-Ezrin、Ezrin、RhoA基因蛋白表达的影响.结果 BAI可抑制喉癌Hep-2细胞增殖、迁移力、侵袭力;可抑制Ezrin、RhoA基因mRNA表达,可抑制p-Ezrin、Ezrin、RhoA蛋白表达,具有浓度-时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BAI通过抑制RhoA在mRNA和蛋白水平的表达,进而抑制RhoA/ROCK-I信号通路,抑制Ezrin磷酸化、Ezrin的表达;此外,对Ezrin表达的抑制作用,将进一步抑制Ezrin与Rho-GDI结合,抑制RhoA活化;也可以通过抑制Rac1激活,而抑制RhoA信号通路.BAI对上述通路的抑制作用,抑制喉癌Hep-2细胞的迁移、侵袭.

摘要： 目的 研究乳腺癌组织中Survivin和Ezrin蛋白表达水平的变化,分析二者对乳腺癌的诊断价值及与各项临床病理特征间的关系.方法 利用免疫组化(SP)法检测乳腺癌、乳腺良性病变中Survivin和Ezrin蛋白的表达水平情况.结果 乳腺良性病变组Survirin水平均显著低于导管内癌组、浸润性导管癌组、小叶原位癌组、浸润性小叶癌组(均P0.05),乳腺癌组织Ezrin水平与年龄及月经情况均无关(均P>0.05),与肿瘤直径及TNM分期相关(均P<0.01).浸润性导管癌组和浸润性小叶癌组乳腺癌组织中Survivin和Ezrin表达水平呈正相关(r=0.489,r=0.495,均P<0.05).结论 Survivin和Ezrin蛋白在乳腺癌的转移和浸润中可能起协同作用.

摘要： Ezrin作为连接细胞骨架和胞膜的重要蛋白,对肿瘤的发生、发展、侵袭、转移都有重要的影响。本文就Ezrin在肿瘤组织中的作用机制进行综述。

摘要： 目的 探讨原发性肝细胞癌中Ezrin和Survivin的表达及其与淋巴结转移的相关性.方法 选取2014年3月—2018年5月右江民族医学院附属医院接受手术切除的原发性肝细胞癌患者98例,采集组织石蜡标本,其中淋巴结转移58例,无淋巴结转移40例.9例肝组织正常样本采自正常肝组织.检测不同分组Ezrin和Survivin的表达水平.结果 正常对照组、无淋巴结转移肝癌组及有淋巴结转移肝癌组中Ezrin阳性表达率分别为33.3％、42.5％ 和69.0％,有淋巴结转移肝癌组Ezrin的表达水平高于无淋巴结转移肝癌组(P<0.05).正常对照组、无淋巴结转移肝癌组及有淋巴结转移肝癌组Survivin阳性表达率分别为0.0％、50.0％ 和84.5％,有淋巴结转移肝癌组Survivin的表达水平高于正常对照组和无淋巴结转移肝癌组(P<0.05).Spearman法相关性分析提示,Ezrin与Survivin的表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05).结论 Ezrin与Survivin在原发性肝细胞癌中的高表达与原发性肝细胞癌的侵袭性行为关系密切,可作为评估早期原发性肝细胞癌预后的指标之一.

摘要： Objective To detect the expressions of RNA-binding proteins QKI-5 and Ezrin in serous ovarian carcinoma and to explore their correlation with the occurrence and development of serous ovarian carcinoma .Methods Forty patients with serous ovarian carcinoma diagnosed in Zhoushan Hospital of Zhejiang University from 2012 to 2017 and 20 normal women were enrolled in this study .Expressions of RNA-binding proteins QKI-5 and Ezrin in ovarian tissue samples were detected by immunohistochemistry , results were analyzed ,and correlation between them was explored .Results Expressions of QKI-5 mRNA and Ezrin in ovarian tissue in serous ovarian carcinoma patients were significantly down-regulated when compared with those in normal controls , and differences were statistically significant (t value was 2 .71 and 3 .72 ,respectively ,both P < 0 .05) .Ezrin positive rate in serous ovarian carcinoma patients was 97 .50% ,while positive rate of Ezrin in ovarian epithelial cells in normal controls was 100 .00% . There was no significant difference between two groups (χ2 = 0 .51 ,P = 0 .48) .Conclusion Down-regulation of expressions of RNA binding-proteins QKI-5 and Ezrin is closely related to pathological process such as tumor occurrence and development in serous ovarian cancer patients ,so these two indicators are expected to be early diagnostic indexes for ovarian cancer ,and they provide new ideas for clinical treatment of ovarian cancer patients .%目的 检测RNA结合蛋白QKI-5、Ezrin在浆液性卵巢癌中的表达,探讨其在浆液性卵巢癌发生发展中的作用.方法 选取2012年至2017年在浙江大学舟山医院就诊且诊断为浆液性卵巢癌的患者40例及正常女性20例为研究对象,采用免疫组化的方法对卵巢组织标本中的RNA结合蛋白QKI-5、Ezrin的表达进行检测,对结果进行分析,并比较两者之间的相关性.结果 与对照组相比,QKI-5 mRNA、Ezrin在浆液性卵巢癌患者卵巢组织中的表达均显著的下调,差异均具有统计学的意义(t值分别为2.71、3.72,均P<0.05).浆液性卵巢癌组织样品中Ezrin阳性率为97.50%,对照组卵巢上皮组织细胞中Ezrin阳性率为100.00%,两组之间比较无显著性差异(χ2=0.51,P=0.48).结论 RNA结合蛋白QKI-5、Ezrin的表达下调与浆液性卵巢癌患者肿瘤的发生发展等临床病理过程相关,这两个指标有望成为卵巢癌的早期诊断指标,并可能为卵巢癌患者临床治疗提供新思路.

摘要： 目的:检测HPA (Heparanase)和Ezrin在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)、癌旁组织和口腔正常组织中的表达,探寻这两种蛋白的表情情况在OSCC的发生发展过程中扮演的角色及其与TNM分期、颈淋巴转移间的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测OSCC患者标本60例,用兔抗人HPA和Ezrin多克隆抗体以及S-P超敏试剂盒进行染色,判断结果,统计分析,得出结论.结果:HPA和Ezrin在口腔正常组织、癌旁组织和OS-CC中表达逐渐增高,且3个组合间的表达差异均具有统计学意义(P＜0.05);HPA和Ezrin在OSCC组织中的表达与其TNM分期、颈淋巴转移间的关系具有显著相关性(P＜0.05);HPA与Ezrin在OSCC组织中的联合表达存在显著正相关性(r =0.998,P＜0.05).结论:HPA和Ezrin在OSCC的演变过程中扮演重要角色;HPA和Ezrin的高表达与OSCC患者的TNM分期、颈淋巴转移间的关系具有显著相关性,能够对是否存在淋巴转移风险做出预测;HPA与Ezrin在OSCC组织中两者联合表达能够对其预后做出初步预测和选择临床治疗方法提供临床参考.

摘要： 本文探讨了膜细胞骨架连接蛋白ezrin、转化生长因子β(TGF-β)受体(TβRⅠ、TβRⅡ)在子宫内膜癌组织中的表达情况及其与临床病理参数之间的关系.方法：采用免疫组织化学方法检测79例子宫内膜癌组织中ezrin、TβRⅠ和TβRⅡ蛋白的表达,选择不典型增生14例,单纯、复合性增生20例以及正常增生期子宫内膜组织15例作为对照.结果：ezrin在子宫内膜癌组织中的表达高于正常增生期子宫内膜组织(P＜001),而TβRⅠ、TβRⅡ相反(P＜0.05,P＜0.01).ezrin在深肌层浸润组的表达强于无肌层浸润及浅肌层浸润组(P=0.014),TβRⅠ、TβRⅡ则相反(P=0.000,P=0.008).TβRⅠ、TβRⅡ分别与ezrin呈负相关关系.结论：eznn过度表达以及TβRⅠ、TβRⅡ表达下降可能都参与了子宫内膜癌的发生和演进过程.

摘要： 目的：Ezrin从属于ERM(ezrin radixin moesin)蛋白家族，其基本功能是将肌动蛋白维系到细胞膜和锚定到膜蛋白的特定部位上，从而参与细胞的移动和粘附。研究表明Ezrin在多种肿瘤中异常表达并可能参与肿瘤的生长和转移。然而．到目前为止，Ezrin参与肿瘤发生发展的直接证据仍然缺乏。食管癌中Ezrin的表达最近才得到初步地阐明。但其功能和相关机制还不清楚。本研究旨在运用RNA干扰等方法探讨Ezrin在食管癌中的功能。方法：我们首先利用免疫蛋白印迹和免疫荧光染色的方法检测了Ezrin在多种食管癌细胞系中的表达情况。然后以其中一种细胞(EC109)为模型，用RNA干扰的方法成功降低了该细胞中Ezrin的表达。然后用克隆形成、MTT生长曲线、裸鼠体内成瘤、Chamber移动实验和细胞侵袭以及细胞粘附等实验检测了Ezrin表达对细胞生物学行为的影响。最后。联合运用cDNA芯片和免疫印迹等方法，初步探讨了Ezrin发挥功能的机制。结果：免疫蛋白印迹的结果提示Ezrin在多种食管癌细胞系中高表达。免疫荧光染色发现，Ezrin不但定位于胞膜下和胞浆中，同时还表达于细胞核内，核内Ezrin主要分布于核浆中。克隆形成和MTT实验表明，Ezrin表达减少后，细胞生长减慢。裸鼠体内成瘤实验也直接证明了Ezrin对细胞生长的影响。移动、侵袭和粘附实验揭示，Ezrin表达的减少，可以导致细胞移动、侵袭以及粘附能力的减弱。接着我们进一步用cDNA芯片的方法揭示，Ezrin表达减少后一系列细胞生长和凋亡相关基因、细胞移动和侵袭相关基因以及细胞粘附相关基因均发生了差异表达，比如TGM2，CTGF和CYR61等。最后，信号通路分析发现，Ezrin表达的减少可以抑制MAPK和TGF-β信号通路。结论：以上结果表明Ezrin参与了食管癌细胞的生长和侵袭过程。其可能的机制是Ezrin通过调节MAPK和TGF-β信号途径影响某些细胞生长与侵袭相关基因的表达，或者是直接参与这些基因的转录调控(国家高技术研究发展计划(2006AA02A403)、国家自然科学基金(30672376和30772485)和广东省自然科学基金(5104541，7118419)资助项目)。

摘要： 本发明公开了一种细胞外Ezrin蛋白及其应用。本发明在支气管肺泡分泌液和母乳中首次发现分泌型Ezrin蛋白。随后在人体各种和外界相通的管腔粘膜中也发现该蛋白高表达，如胃粘膜、肠道粘膜、胆囊粘膜、胎盘绒毛膜、子宫内膜等。进一步实验发现细胞内Ezrin可以抑制肿瘤细胞的增殖，而分泌型Ezrin不影响细胞的增殖能力。分泌型Ezrin可以明显抑制白细胞穿过基底膜的侵润能力，而细胞内的Ezrin几乎不具有该项能力。这一结果表明细胞外的分泌型Ezrin具有很强的免疫抑制功能，进而有望成为治疗免疫相关疾病药物开发的新途径。

摘要： 本发明公开了一种脑胶质瘤患者血清多肽分子及应用，所述血清多肽诊断标志物Ezrin的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，Ezrin为人埃滋蛋白，其精确分子量为1947.02道尔顿。Ezrin在脑胶质瘤患者血清检测中呈现特异性的高表达，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(MALDI‑TOF‑MS)检测Ezrin或ELISA方法测检测Ezrin的表达水平，可作为脑胶质瘤患者血清的检测方法。

摘要： 本发明公开了一种细胞外Ezrin蛋白的应用。本发明在支气管肺泡分泌液和母乳中首次发现分泌型Ezrin蛋白。随后在人体各种和外界相通的管腔粘膜中也发现该蛋白高表达，如胃粘膜、肠道粘膜、胆囊粘膜、胎盘绒毛膜、子宫内膜等。进一步实验发现细胞内Ezrin可以抑制肿瘤细胞的增殖，而分泌型Ezrin不影响细胞的增殖能力。分泌型Ezrin可以明显抑制白细胞穿过基底膜的侵润能力，而细胞内的Ezrin几乎不具有该项能力。这一结果表明细胞外的分泌型Ezrin具有很强的免疫抑制功能，进而有望成为治疗免疫相关疾病药物开发的新途径。

摘要： 本发明公开了一种细胞外Ezrin蛋白及其应用。本发明在支气管肺泡分泌液和母乳中首次发现分泌型Ezrin蛋白。随后在人体各种和外界相通的管腔粘膜中也发现该蛋白高表达，如胃粘膜、肠道粘膜、胆囊粘膜、胎盘绒毛膜、子宫内膜等。进一步实验发现细胞内Ezrin可以抑制肿瘤细胞的增殖，而分泌型Ezrin不影响细胞的增殖能力。分泌型Ezrin可以明显抑制白细胞穿过基底膜的侵润能力，而细胞内的Ezrin几乎不具有该项能力。这一结果表明细胞外的分泌型Ezrin具有很强的免疫抑制功能，进而有望成为治疗免疫相关疾病药物开发的新途径。

摘要： 本发明涉及一种Ezrin抗原决定簇多肽及其磷酸化Thr566抗体制备方法和采用该抗体制备的试剂盒。包括以下氨基酸序列：CGRDKYKTLRQIRQ；CGRDKYKT-PLRQIRQ。本发明利用磷酸化修饰Ezrin的抗原决定簇多肽，得到的多克隆抗体可达到识别Ezrin第566位点苏氨酸磷酸化，使用酶联免疫法可以快速方便检测Ezrin蛋白磷酸化水平，相比常规方法更节约时间与样品，具有十分广阔的科研价值和经济前景。

摘要： 本发明公开了ezrin在制备哮喘诊断试剂中的应用，在健康人和哮喘患者的呼出气冷凝液(EBC)和血清(serum)中发现，健康人的ezrin的水平能与哮喘患者明显相区别：哮喘患者的EBC和血清中的ezrin水平显著下降，并且与肺功能呈正相关关系，与血清中IL‑13及骨膜蛋白水平成负相关关系，因此可以通过监测人体血清(serum)或者呼出气冷凝液(EBC)中ezrin的水平，从而对哮喘进行诊断、协助其治疗，并评估预后。本发明能通过更简便的方式在支气管哮喘疾病的预测、诊断和评估方面起到指导作用，并能更敏感地反映哮喘患者的气道屏障功能改变情况。基于此生物标记物的功能，有望制备更可靠更敏感的试剂盒，直接反映哮喘控制情况，并指导其治疗和评估预后。

摘要： 本发明属于分子生物学领域，具体涉及CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子的方法、用于靶向人ezrin基因增强子的特异性gRNA以及一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株。本发明提供了用于敲除人ezrin基因增强子的特异性gRNA，所述gRNA的靶DNA序列为SEQ ID NO.1‑4所示序列中的任意一条序列。本发明提供了一种敲除人食管癌细胞ezrin基因增强子的方法，为利用CRISPR/Cas系统在人食管癌细胞中对ezrin基因进行改造。本发明还提供了一种敲除人ezrin基因增强子的食管癌细胞株，为研究ezrin基因表达与肿瘤侵袭移动的相关性提供了有效的平台。

摘要： 本发明公开了ezrin在制备哮喘诊断试剂中的应用，在健康人和哮喘患者的呼出气冷凝液(EBC)和血清(serum)中发现，健康人的ezrin的水平能与哮喘患者明显相区别：哮喘患者的EBC和血清中的ezrin水平显著下降，并且与肺功能呈正相关关系，与血清中IL‑13及骨膜蛋白水平成负相关关系，因此可以通过监测人体血清(serum)或者呼出气冷凝液(EBC)中ezrin的水平，从而对哮喘进行诊断、协助其治疗，并评估预后。本发明能通过更简便的方式在支气管哮喘疾病的预测、诊断和评估方面起到指导作用，并能更敏感地反映哮喘患者的气道屏障功能改变情况。基于此生物标记物的功能，有望制备更可靠更敏感的试剂盒，直接反映哮喘控制情况，并指导其治疗和评估预后。

摘要： 本发明属于分子生物学领域，具体涉及CRISPR/Cas9靶向敲除人ezrin基因增强子关键区的方法及其特异性gRNA，本发明根据CRISPR/Cas9的设计原则，在人ezrin基因增强子关键区的上下游设计两个靶位点，合成相应的寡核苷酸序列，并连接至载体pX459上构建重组质粒，将其转染人食管癌细胞株，能够特异性敲除人ezrin基因增强子关键区。本发明对研究以人ezrin基因增强子为靶点的肿瘤临床治疗具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种基于ezrin磷酸化的物质及其应用。本发明提供了抑制Ezrin第567位苏氨酸磷酸化的物质在制备具有抑制肿瘤功能的产品中的应用。所述抑制Ezrin第567位苏氨酸磷酸化的物质为如下1)或2)中任一一种：1)如下所述编码基因或所述的重组载体或重组腺病毒；2)抑制介导Ezrin第567位苏氨酸磷酸化的信号通路的物质。本发明的实验证明，在肝癌转移中相伴发生的Ezrin第567位苏氨酸的磷酸化受Rho激酶(ROCK)调控，敲除该激酶或者抑制其活性均可以减少肝癌转移的发生，在医学及制药领域发挥重要作用，应用前景广阔。