卵子发生

摘要： 哺乳动物配子发生的基因表达调控包括编码基因的阶段特异性表达调控及非编码基因的转录和转录后水平调控。微小RNA(microRNA,miRNA)作为一类小的非编码RNA,通过识别靶基因非翻译区的结合位点,导致mRNA降解或者蛋白质翻译抑制,从而在转录后水平发挥调控作用。近年来,miRNA在哺乳动物生殖活动中的作用逐渐被揭示,越来越多的研究表明,miRNA在哺乳动物精子发生、精子成熟、卵母细胞成熟、卵泡发育及早期胚胎发育等过程中都发挥着重要的调节作用,其可通过调节支持细胞的增殖和凋亡或精原细胞、精母细胞及精细胞的细胞周期进程,在精子发生的不同阶段发挥间接或直接调控作用,也可通过调节卵母细胞、卵丘细胞以及颗粒细胞的增殖、凋亡、激素合成和细胞间作用,对卵母细胞的发育和成熟过程进行调控。作者主要介绍了在哺乳动物配子发生过程中,miRNA的细胞和阶段特异性表达及其对靶基因的调节作用,以期为深入研究哺乳动物配子发生的调控机制提供参考。

摘要： 酪氨酸3-单加氧酶/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Tyrosine 3-Monooxygenase/Tryptophan 5-Monooxy genase Activation Protein,YWHA)家族具有多种生理功能,主要通过调控靶蛋白活性参与调节细胞周期、信号转导、细胞凋亡和细胞代谢等重要生命活动。YWHA家族蛋白高度保守,广泛表达于从植物到动物的各种真核生物中。哺乳动物中存在7种YWHA亚型,分别由不同的基因编码。本文综述了YWHA蛋白结构、在哺乳动物生殖方面以及生殖系统疾病中的功能,为阐明YWHA蛋白在哺乳动物配子发生和生殖过程中的功能提供参考和借鉴。

摘要： 研究以初孵扬子鳄(Alligator sinensis)性腺组织为实验材料,开展Forkhead box家族蛋白-1(FoxO1)基因CDS区克隆和序列特征分析。利用免疫组织化学检测其在胃、肠和肺脏等组织中的表达谱,结合免疫荧光(IF)、RT-PCR和Western Blot探讨其在不同出壳后日龄(17日龄、63日龄和96日龄)雌性扬子鳄性腺组织中的时空表达规律,探讨其在雌性扬子鳄性腺发育过程中的生物学功能。研究成功克隆获得FoxO1基因长度为1941 bp的完整编码区及646个预测编码氨基酸序列。与其他物种间进行同源性比对和构建进化树分析发现,扬子鳄FoxO1基因与鸟类的亲缘关系相较中华鳖(Pelodiscus sinensis)和原矛头蝮(Protobothrops mucrosquamatus)等爬行动物更近。在其他脊椎动物中,哺乳动物、硬骨鱼和两栖物种也各自聚类称为子群,表明FoxO1兼具功能保守性和种间特异性;免疫组织化学结果表明FoxO1在初孵鳄性腺复合体、肺、胃和肠中均有表达,免疫荧光结果表明17日龄性腺组织中的FoxO1主要表达于肾上腺和中肾区但在皮质部呈微弱表达,在63日龄性腺皮质部表达逐渐上调且呈无规则随机分布,在96日龄性腺皮质部中卵母细胞发育程度更高的位置呈强表达;RT-PCR结果表明不同时期扬子鳄性腺组织FoxO1基因mRNA表达量差异不显著, Western Blot结果显示性腺组织中的FoxO1表达量呈先上升后下降的变化模式,表现为63日龄FoxO1基因表达量显著高于17日龄和96日龄,相关结果对于丰富扬子鳄卵子发生调控机制提供了重要的研究参考。

摘要： 文章采用组织切片、透射电镜技术对广西北海营盘海域钝缀锦蛤(Tapes conspersus)的卵巢发育、卵子发生的组织学及卵黄发生的超微结构进行研究。结果显示,钝缀锦蛤卵巢发育一年为一个繁殖周期,分为增殖期(6月底—7月)、生长期(7月中旬—10月中旬)、成熟期(11月—翌年2月底)、排放期(3月—4月)、休止期(5月—6月)共5个时期。钝缀锦蛤卵巢发育受水温的影响较大,个体间的性腺发育并不完全同步。在广西北海营盘海域,钝缀锦蛤每年在6月底—7月初性腺开始发育,在翌年3月—4月底成熟的卵子大量排放。依据钝缀锦蛤卵细胞发育的相关特点,可将其划分为4个主要阶段,第一阶段为卵原细胞期,第二阶段为初级卵母细胞期,第三阶段为次级卵母细胞期,第四阶段为成熟卵母细胞期。根据透射电镜观察钝缀锦蛤卵黄的发生,可将其分为3个主要时期,第一时期为卵黄合成前期,第二时期为卵黄合成期,第三时期为卵黄合成后期。

摘要： 明确雌成虫的卵巢发育及其卵子发生有利于害虫发生期和发生量的准确预测及其防治适期的确定。本研究在观察重大外来入侵害虫番茄潜叶蛾Tuta absoluta雌成虫生殖系统结构和卵巢发育级别的基础上,进一步比较了营养条件和是否交配处理,即未交配+清水、未交配+20%葡萄糖溶液、交配+清水、交配+20%葡萄糖溶液条件下番茄潜叶蛾的卵子发生动态。结果显示:雌成虫生殖系统主要包括卵巢、输卵管、附腺、交配囊、阴道支囊、受精囊及受精囊腺等组织;左右两侧卵巢的卵巢管数大多相等,各含4根卵巢管;卵巢发育进度可分为卵黄沉积前期(Ⅰ级)、卵黄沉积期(Ⅱ级)、成熟待产期(Ⅲ级)、产卵盛期(Ⅳ级)和产卵末期(Ⅴ级)5个级别。雌成虫只取食清水也可持续形成成熟卵子,未交配雌虫卵子数量于羽化72 h达到高峰,发育至96 h时显著减少,并观察到卵子重吸收现象。取食20%葡萄糖溶液可显著促进雌虫的卵子发生,其成熟卵子、总卵子数在羽化后24 h均显著多于取食清水;雌虫发生卵重吸收后,补充取食20%葡萄糖溶液,卵巢内各类卵子数显著增加。交配对雌成虫卵子发生有明显促进作用,取食20%葡萄糖溶液或清水的交配雌虫,羽化96 h后,成熟卵子数均显著多于未交配雌虫。研究结果可为该入侵害虫的田间生态调控提供依据。

摘要： [目的]为鱼类生殖生理学和繁殖生物学研究提供参考.[方法]以稀有鮈鲫为试验动物,采用mTOR通路抑制剂雷帕霉素处理3月龄雌性个体至4月龄,正常饲养至5月龄,以同时注射等量不合雷帕霉素的稀释剂和二甲基亚砜(DMSO)为对照,测定不同阶段性腺指数(GSI)和卵巢发育情况,Real time PCR检测卵子发生相关基因的表达情况.[结果]3、4、5月龄对照组和3月龄处理组卵巢具有IV时相卵母细胞,4月龄处理组只具有I、II时相卵母细胞,5月龄处理组卵巢中观察到III时相卵母细胞;处理组GSI显著低于对照组;处理组中oxl2、fshr、cyp11a1、cyp19a1a和bmp 15表达显著低于对照组,figlα在处理组中表达显著高于对照组.[结论]雷帕霉素处理导致稀有鮈鲫卵母细胞发育停滞在II时相,推测mTOR通路可能通过调节类固醇发生和TGFβ信号通路促进卵母细胞的发育和成熟.

摘要： [目的]龟纹瓢虫捕食蚜虫、粉虱、木虱等多种害虫,是农林业重要天敌昆虫.掌握龟纹瓢虫雌雄内生殖系统结构及卵细胞生成过程,为龟纹瓢虫人工繁育提供理论依据.[方法]采用组织石蜡切片技术和内部解剖,在光学显微镜下观察龟纹瓢虫雌雄成虫内生殖器及卵子发生过程.[结果]龟纹瓢虫雄性内生殖系统包括1对精巢、1对雄性附腺、1对输精管、贮精囊、射精管;雌性内生殖系统包括1对卵巢、1对侧输卵管、中输卵管、受精囊、生殖腔,每侧卵巢含11～13根卵巢管;卵巢管生长区可见4粒发育程度不同的卵母细胞,根据卵黄沉淀情况、滤泡细胞形态变化将卵子发生划分为前期、中期、后期、末期4个时期.[结论]卵巢结构、卵巢管和卵母细胞数量有助于解释龟纹瓢虫产卵量,不适宜的饲养条件可能抑制卵巢发育,进而导致龟纹瓢虫产卵量发生变化.因此,为实现龟纹瓢虫的规模化应用,人工繁育中应创造最优营养和环境条件以保障产生更多成熟卵细胞.

摘要： 近日,中国农业科学院棉花研究所棉花虫害与生物安全创新团队利用动态转录组分析、基因沉默技术开展了保幼激素调控龟纹瓢虫卵子发生和卵黄生成研究,从生理水平与基因转录水平阐述了保幼激素对龟纹瓢虫生殖发育的调控作用,为龟纹瓢虫的规模化人工饲养奠定了理论基础。相关研究成果发表在《基因组学(Genomics)》上。

摘要： 研究背景及思路疟疾每年全球范围内导致超过40万人死亡,同时带来约27亿美元的经济损失。疟疾的主要传播媒介是按蚊。按蚊必须吸食至少一种脊椎动物的血液才能启动自身的卵子发生途径。按蚊吸血后数小时内,血液淋巴中的氨基酸水平显著升高,进而激活雷帕霉素靶点(the target of rapamycin,TOR)信号通路。TOR蛋白激活下游靶蛋白S6激酶(S6K),使其磷酸化,经过一系列信号分子,最终刺激蛋白质翻译并启动按蚊卵子发育并产卵。

摘要： H1连接组蛋白(H1 linker histone,H1)是染色质结构和功能的关键调节因子。在相邻的核小体之间,H1与连接体DNA(linker DNA)结合构成染色质的念珠状结构,以稳定染色质的高级结构、调节基因表达。研究发现一种H1亚型,命名为卵母细胞特异性连接组蛋白(oocytespecific linker histone,H1foo),在哺乳动物卵母细胞中特异性表达。文章主要针对H1foo在卵巢卵泡、卵母细胞及早期胚胎发育中的表达分布模式,H1foo在卵母细胞减数分裂恢复和早期胚胎发育中的作用,H1foo在卵母细胞受精和体细胞核移植过程中与其他成分置换、实现基因组的完全重编程、恢复全能性中的重要作用进行综述,以期为相关机制研究提供参考。

摘要： 本发明属于基因治疗技术领域，具体为CDC20突变引发卵子成熟障碍的卵子功能恢复制剂及其使用方法。卵子成熟障碍患者临床表现为试管婴儿术中，患者促排后大多无法获得成熟卵子或成熟卵子受精率低，无有效胚胎，因而试管婴儿反复失败。本发明提供的用于恢复由CDC20基因突变引发卵子成熟障碍的卵子功能的制剂，由一定浓度CDC20cRNA或CDC20蛋白质配制而成；给患者的卵子注射上述制剂使卵子完成成熟过程或显著提高受精率，并可获得有效胚胎及最终建立妊娠。

摘要： 本发明属于基因治疗技术领域，具体为一种TRIP13基因突变引发卵子成熟障碍的卵子功能恢复制剂及其使用方法。卵子成熟障碍患者临床表现为试管婴儿术中，患者促排后大多无法获得成熟卵子或成熟卵子受精率低，无有效胚胎，因而试管婴儿反复失败。本发明提供的用于恢复由CDC20基因突变引发卵子成熟障碍的卵子功能的制剂，由一定浓度TRIP13cRNA或TRIP13蛋白质配制而成；给患者的卵子注射上述制剂使患者卵子完成成熟过程或显著提高受精率，并可获得有效胚胎及最终建立妊娠。

摘要： 本发明涉及玻璃化冷冻并解冻用于体细胞克隆的动物的卵子的方法，更详细地，涉及一种玻璃化冷冻并解冻犬科动物的卵子的方法及根据该方法的冷冻解冻卵子。与现有的狗玻璃化冷冻卵子生产技术由于发情周期不同难以同步实验日程相反，本发明的玻璃化冷冻并解冻犬科动物的卵子的方法及根据该方法的冷冻解冻卵子，即使在不同的日子发情，也可将采取的卵子通过玻璃化冷冻技术来同步实验日程，能够显示出高的核移植及受精的效果。

摘要： 本发明公开了CFL1蛋白在食蟹猴超数排卵良好应答和卵子发育预测中的应用，属于超数排卵技术领域。通过蛋白质组学的方法对重复超排成功的食蟹猴和仅第一次成功的食蟹猴在超排第一天、超排第二天的血浆样本蛋白进行生物信息分析。从蛋白质水平研究，对揭示超数排卵猴血浆的蛋白表达变化进行了探讨。CFL1在超排第二天中水平升高且幅度大于两倍，则可能预示着超排应答成功，卵母细胞数量和质量达标；否则则可能预示着失败，成熟卵母细胞少且质量差。CFL1成为预测食蟹猴超数排卵良好应答、卵母细胞数量和质量达标的新分子，具有实际应用价值。

摘要： 本发明公开了PROZ蛋白在食蟹猴超数排卵良好应答和卵子发育预测中的应用，属于超数排卵技术领域。通过蛋白质组学的方法对重复超排成功的食蟹猴和仅第一次成功的食蟹猴在超排第一天、超排第二天的血浆样本蛋白进行生物信息分析。从蛋白质水平研究，对揭示超数排卵猴血浆的蛋白表达变化进行了探讨。PROZ在成功组第二天下调，在失败组的第二天上调，可能预示着超排的成功或失败。在超排第二天中水平下降且幅度大于两倍，则可能预示着超排应答成功，卵母细胞数量和质量达标；否则则预示着失败，成熟卵母细胞少且质量差。PROZ蛋白成为预测食蟹猴超数排卵良好应答的新分子，以及卵子发育的预言分子，具有实际应用价值。

摘要： 本发明公开了一种利用孤雌激活的孤雌胚胎干细胞体外分化形成卵子的方法，该方法用锶离子和细胞松弛素D处理获得孤雌激活胚胎并建立孤雌胚胎干细胞细胞系，进一步分化形成原始生殖细胞样细胞，将所述原始生殖细胞样细胞与小鼠雌性胚胎性腺体细胞聚合移植到联合免疫缺陷型小鼠体内获得卵子；通过该技术可以产生无限多的正常功能性卵子，该技术无论对于临床治疗不孕不育或卵巢早衰，还是科学研究过程中获得足量的高质量卵子均具有重要的意义。

摘要： 本发明公开了一种鳜卵子的体外保存液及其应用，保存液按体积分数计其包含以下各组分：培养液60％～70％、营养液15％～20％、鱼卵巢液9％～23％和抗菌液1％～2％；本发明还公开了鳜卵子的体外保存液的应用，将离体的成熟鳜卵子浸泡于所述的鳜卵子的体外保存液中，浸泡条件为0.8～1毫升/150～200粒，16～20°C下可浸泡保存2～3小时后受精率在90％以上、孵化率在89％以上，畸形率在0.5％以下，解决了鳜雌雄催产效应时间不同步所带来的技术难题。

摘要： 本发明涉及一种卵子玻璃化冷冻保护液的制备方法，属于人类辅助生殖技术领域，包括以下步骤：量取2.8‑3.2ml PBI、1.6‑1.8g蔗糖，将蔗糖置于PBI中，溶解，再加入1.8‑2.2ml胎牛血清、1.3‑1.7ml乙二醇、1.3‑1.7ml二甲基亚砜，用PBI定容至10ml，将18‑22μL的0.1M EDTA溶液与上述PBI混合即得卵子玻璃化冷冻液。本发明制备方法与现有技术相比，本发明方法简单易操作，本发明原料来源广泛，易取得，成本低，本发明方法制得的冷冻液内添加有乙二醇、二甲基亚砜、蔗糖，不仅可以有效地保存卵子、胚胎及组织细胞的活力，增加卵子、胚胎存活率和相应的成功率，从而提高辅助生殖技术的成功率，同时，也为辅助生殖技术的安全性提供了有力保证，是卵子玻璃化冷冻保护液的制备方法上的一大创新。

摘要： 本发明提供一种用于不间断获取卵子的收集装置及方法，所述装置包括卵子收集管、负压补偿管、卵泡液储存箱以及恒温保温箱，所述卵子收集管包括底部设置有开口的管体以及设置在管体的下端口处的过滤筛；所述负压补偿管的管体底部设置有开口且与卵子收集管的直径相同；所述卵泡液储存箱与卵子收集管、负压补偿管密封连接；所述恒温保温箱为内部中空且设置有加热装置的用于放置卵泡液储存箱及与之连接的卵子收集管和负压补偿管的箱体。本发明实现了取卵手术中的不间断取卵，不需要暂停更换收集管，提高了取卵手术的效率，降低了卵子的体外暴露时间和污染风险，提高了卵子发育潜能，过滤筛与无菌培养皿的配合设计方便了后续的捡卵和培养操作。

摘要： 本发明公开了一种解冻卵子或胚胎专用的控温计时材料箱，包括主箱体、冷冻仓、保温仓和储物仓，所述主箱体为四棱柱状箱体，主箱体下半部分滑动安装储物仓，主箱体上半部分中段设置冷冻仓，冷冻仓左右两侧设置保温仓，主箱体前侧面上段中央安装智能计时器；所述冷冻仓、保温仓周围安装保温隔热材料。本发明设置了储物仓用于专门放置胚胎或卵子解冻所需的各种试剂和器材，节约时间，提高效率；配备了冷冻仓，能同时放置多个载杆，避免了医务人员反复来回奔走，减轻了工作负担；设置了专用的保温箱专用于试剂保温，降低了能源消耗；配备了语音控制的智能计时器，无需操作者直接用手设置，避免分散注意力，保证解冻过程稳定进行。