离子交换层析

摘要： 为了深入研究荞麦中抗真菌类蛋白质,选择荞麦品种‘晋荞2号’籽粒为试验材料,先经过筛、脱脂,然后利用缓冲液浸提、硫酸铵盐析提取籽粒中总蛋白,水浴锅中80°C下热处理去除杂蛋白,经过Resourse S阳离子交换层析和Superdex Peptide HR10/300分子筛层析两步分离纯化,建立了一套荞麦抗真菌蛋白分离纯化的工艺。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该抗真菌蛋白的相对分子质量,牛津杯法测定抑菌活性,倒置显微镜观察真菌形态变化。结果表明:试验获得的荞麦籽粒抗真菌蛋白在蛋白胶图上表现出单一条带,纯度较高,相对分子质量为8.2 kDa。该抗真菌蛋白对绿色木霉的生长有明显的抑制作用,并且呈现一定的剂量依赖性。形态学观察发现,菌丝生长受到抑制,表现出顶端部膨大、泡状物出现、原生质凝缩及片段化等特征。

摘要： 目的 提取和分离纯化柏树花粉主要致敏蛋白Cup a 1.方法 使用40 mmol/L NH4 HCO3缓冲液作为提取液对柏树花粉致敏蛋白进行粗提取,利用离子交换层析初步纯化其主要致敏蛋白Cup a 1,收集400 mmol/L NH4 HCO3组分的洗脱液,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对收集的组分进行鉴定.结果 柏树花粉有20余条蛋白区带,通过离子交换层析纯化出相对分子质量43000的蛋白组,主要集中在Ⅲ峰.结论 初步分离纯化及鉴定了柏树花粉主要致敏蛋白Cup a 1,为临床过敏原致病机制的诊断和治疗奠定了基础.

摘要： 以香菇柄为原料,采用热水浸提联合离子层析和凝胶过滤层析对其中多糖进行提取纯化,并就所得多糖的抗氧化活性进行初步研究.结果显示,热水浸提法提取香菇柄粗多糖得率可达4.3％,将该粗多糖依次经由离子交换层析和凝胶过滤层析纯化后多糖得率为2.26％.得到的香菇柄多糖干品为棕色粉末,易溶于水,对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除效果存在一定的量效关系,清除这两种自由基的能力均可达到30％以上.相关结果可为香菇柄的综合开发利用提供基础数据和理论指导.

摘要： 以香菇柄为原料,采用热水浸提联合离子层析和凝胶过滤层析对其中多糖进行提取纯化,并就所得多糖的抗氧化活性进行初步研究。结果显示,热水浸提法提取香菇柄粗多糖得率可达4.3%,将该粗多糖依次经由离子交换层析和凝胶过滤层析纯化后多糖得率为2.26%。得到的香菇柄多糖干品为棕色粉末,易溶于水,对DPPH自由基和ABTS+自由基的清除效果存在一定的量效关系,清除这两种自由基的能力均可达到30%以上。相关结果可为香菇柄的综合开发利用提供基础数据和理论指导。

摘要： 血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白是禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)表面的一种糖蛋白,能诱导机体产生中和抗体,也是AIV主要的保护性抗原.已在水稻(Oryza sativa)胚乳中成功表达禽流感病毒H9N2 HA蛋白.为了建立水稻源禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白的纯化方法,本研究分别采用两种方法进行HA蛋白的纯化.方法一:将HA蛋白水稻粉末按照质量与体积1:5比例加入到提取液中,室温下搅拌,离心、取上清液,过滤后,首先经Q阴离子层析捕获到HA粗提蛋白,其次利用HA蛋白抗体亲和层析精细纯化HA蛋白,收集洗脱液,检测目的蛋白;方法二:用与方法一同样的方法获得HA粗提蛋白,根据Butyl疏水填料特性,HA粗提蛋白液中加入硫酸铵,搅拌、离心和过滤,进行第2步纯化,将收集到的洗脱液浓缩、换液,再经过SP阳离子层析纯化,收集洗脱液,获得HA蛋白.将两种方法纯化的HA蛋白经过SDS-PAGE和Western blot检测蛋白的纯度,并将HA蛋白送公司测序.结果表明,方法一:Q阴离子层析与HA免疫抗体亲和层析两种组合纯化HA蛋白的纯度约为90％左右.该组合纯化蛋白的方法相对简单,但需要培养和纯化单克隆抗体,此方法适合实验室快速小规模的蛋白纯化;方法二:Q阴离子层析、Butyl疏水层析和SP阳离子层析3种组合纯化的HA蛋白纯度达到90％左右.该方法适合建立HA蛋白的纯化工艺,用于大规模纯化HA蛋白.这两种方法获得的HA蛋白经测序与已知的氨基酸序列一致.本研究首次建立2种从水稻中获得高纯度重组H9N2亚型HA蛋白的方法,为今后制备禽流感H9N2亚型亚单位疫苗提供基础资料.

摘要： 目的 构建凋亡素组合肽(B9)基因工程菌,建立重组凋亡素组合肽的纯化方法,在细胞水平上研究重组凋亡素组合肽抗U251胶质瘤细胞活性.方法 以pET28a质粒为表达载体构建凋亡素组合肽基因工程菌;经过等电点沉淀、PAA沉淀和阳离子交换层析纯化重组凋亡素组合肽;获得的充足凋亡素组合肽处理U251细胞,检测细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭.结果 建立了以等电点沉淀、PAA沉淀和阳离子交换层析为核心技术的纯化重组凋亡素组合肽的方法,纯化的凋亡素组合肽纯度达到了电泳纯.重组的凋亡素组合肽能诱导U251细胞凋亡,抑制U251细胞的增殖、迁移和侵袭.结论 建立了纯化重组凋亡素组合肽的实验方法,重组凋亡素组合肽在细胞水平上诱导U251细胞凋亡,抑制U251细胞增殖、迁移和侵袭.

摘要： 本研究以海生红藻多管藻(Polysiphonia urceolata)为材料,用DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Butyl Sepharose 4 Fast Flow疏水作用层析,从Sephacry S-300(S-300)凝胶过滤所得R-藻红蛋白中分离纯化出在带电性和疏水性表现结构特性差异的2种R-藻红蛋白组分,R-PEI和R-PEII.这2种R-藻红蛋白在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和非变性等电聚焦(native isoelectric focusing,Native-IEF)中均表现单一条带,等电点(pI)分别为R-PEI 4.7,R-PEII 4.6.R-PEI和R-PEII有着相同的荧光光谱和400～750 nm吸收光谱,仅在波长小于400 nm时R-PEI表现出大于R-PEII的紫外光吸收.SDS-PAGE多肽组成分析结果证明,R-PEI和R-PEII不仅有相同的α、β、γ 等有色亚基,而且含有相同无色多肽.这些结果表明,R-PEI和R-PEII来自于多肽链的结构特性变化,没有对R-藻红蛋白各亚基的发色团构象及其微环境产生明显影响.

摘要： 为获得较高纯度的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2) Cap蛋白的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)并对其进行结构和功能研究,本试验以大肠杆菌表达系统表达了PCV2重组Cap (PCV2 rCap)蛋白,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300 HR凝胶过滤层析、Capto Q离子交换层析、CsCl密度梯度离心等方法对其进行了纯化.通过Western blotting对纯化所得蛋白进行免疫反应性鉴定,透射电镜(TEM)观察纯化蛋白的粒径及形态,高效液相尺寸排阻色谱(HPSEC)检测其组分分布.结果 显示,纯化后PCV2 rCap蛋白经SDS-PAGE检测,可见28 ku的目的蛋白带,灰度扫描法检测其纯度为97.53％.Western blotting结果显示,该处的特异性蛋白条带有明显的免疫反应性;TEM检测其为粒径17.35～19.24 nm的规则球形颗粒,表明所获得的PCV2 rCap蛋白在表达时能在菌体内自我装配成VLPs,且在纯化过程中没有被破坏而解聚,仍保持天然状态;HPSEC检测纯化样品中VILPs含量为92.67％.本试验结果为进一步研究PCV2 VLPs的空间结构及其免疫保护机制提供了参考依据.

摘要： 应用平板式膜超滤技术与DEAE离子交换层析法对卵黄免疫球蛋白(IgY)进行分高纯化。首先,卵黄液经过缓冲液稀释分离;然后,用平板式膜组件对其超滤,并且分析了各种因素对其的影响,确定分子截留量为100kDa,操作压力差为0.12MPa、进料温度为30°C,pH5.2,截留液抗体回收率达到91.89%,纯度为86%；最后,经DEAE高子交换层析得到高纯度的IgY。

摘要： 本文以双组分混合物中目标蛋白的分离纯化为模型，研究了目标蛋白在离子交换层析柱上的分离纯化策略，以期从简单的分离模型推广到普遍适用的模型，解决蛋白质混合物的实际分离问题，为中试和规模化分离纯化目标蛋白提供了高效和可行的方案。分别以CM Sepharose Fast-Flow阳离子交换层析和Sources TM30Q阴离子交换层析分离纯化溶菌酶和猪血红蛋白为例，对蛋白质的活性、纯度、回收率、进料量等操作因素进行了分离条件的优化，验证了这种分离纯化策略的可行性，并在此基础上，采用DEAF Sepharose Fast-Flow阴离子交换层析分离纯化了猪血红蛋白单体粗品，纯化后的猪血红蛋白单体经过高效液相色谱检测其纯度在98%以上，蛋白质收率在94%以上，节省时间在30min以上。高铁血红蛋白含量低于3.4%，并为人血液替代品项目提供了高纯原料。

摘要： 将分子模拟方法引入到蛋白质离子交换层析中静电相互作用研究。选用蛋清溶菌酶和牛胰凝乳蛋白酶为模型蛋白质，阳离子交换吸附剂SP Sepharose FF 等为模型层析介质。根据PDB 数据库中获得的蛋白质三维结构数据，分析了介质孔径和配基分布，以点电荷模拟离子化功能配基，构筑了蛋白质-介质配基模拟表面体系。采用MCCE、Delphi 和GRASP 等程序包进行了分子模拟计算，考察了作用方向、作用距离、盐浓度、pH 等对蛋白质和模拟配基平面间静电相互作用的影响。结果表明，宏观的层析平衡常数与微观分子模拟计算的相互作用能量参数间存在良好的线性关系。

摘要： 手性环氧氯丙烷(ECH)是一种高价值的中间体,用以合成药制品和农用化学品,具有广阔的市场前景.手性环氧氯丙烷的合成方法有化学法和生物法,化学法选择性差,重金属催化剂污染严重,生物法选择性较好,且对环境友好.从土壤中筛选出一株能将环氧氯丙烷立体选择性水解为R-邻二醇的细菌ZJBT09106.对其产酶条件进行了研究,最佳碳源:柠檬酸钠22.26 g/l,淀粉10 g/l.最佳氮源:酵母浸出汁10 g/l,牛肉膏16 g/l.最佳诱导剂3-氯-1，2-丙醇,加入量为0.02%.通过优化,酶活达到203 U/l,生物量达3.0 g/l.进一步通过超声波破碎,硫酸铵沉淀,DEAE 离子交换层析,得到该氧化还原酶的纯酶,分子量为30kD,比酶活为0.396 U/mg,得率为15.2%.

摘要： 目的：建立一种简便、快速分离纯化激肽释放酶原的方法。rn 方法：运用分子筛和离子交换层析技术，从人血浆中快速分离纯化激肽释放酶原，同时比较了分子筛层析柱与透析置换缓冲液两种前处理方法的优劣，以及三种不同的离子交换介质(DEAE-Sepharose FF，Q-sepharoseFF和Q-Sepharnse XL)纯化激肽释放酶原的效果。rn 结论：该工艺与传统工艺相比，具有快速、回收率高等优点，是一种从血浆中快速纯化功能纯激肽释放酶原的有效方法。

摘要： 目的：探讨室温条件下，不同离子强度和PH值对离子交换层析法制备高纯度凝血因子Ⅷ影响。方法：初步选择层析条件，检测280 nm吸光值比较不同离子强度对制备高纯度凝血因子Ⅷ的影响；采用pH梯度法，逐步降低PH，寻找适宜的pH。结果：离子强度和pH均能不同程度地影响高纯凝血因子Ⅷ的制备。在实验范围内，选择缓冲液中含135 mmoL/L氯化钠和pH6.8组合时，制备出的凝血因子Ⅷ回收率和比活比较理想。结论：离子交换层析法制备高纯凝血因子Ⅷ的过程中，选择合适的离子强度和pH值极其重要。

摘要： 目的：对WuT3杂交瘤细胞无血清生物反应器培养上清中单克隆抗体进行分离纯化，建立中试分离纯化工艺。rn 方法：采用二步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化wul3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后，进行中量放大和中试放大。rn 结果: 建立的纯化方法可以放大到中试规模，每批投料30000ml培养上清可收获单抗达1.5g，单抗总回收率＞60％。经分离纯化后，单抗IgG纯度＞95％，采用免疫荧光法检测抗体活性合格。rn 结论: 建立了一条生物反应器无血清培养杂交瘤细胞收获上清的大规模分离纯化工艺路线。

摘要： X蛋白生产工艺流程图X蛋白为糖修饰蛋白的一种,是我公司研发上市的重要的品种之一,公司较重视该产品的质量及产率.X蛋白经过QHP工艺优化后，层析高一步收率20%，折合原液产量提高30mg。制剂制备成品为5400支，直接经济效益达到100万。顺利达成了预期设定的目标。在实验实施和问题分析解决过程中，小组成员的个人能力、TQC知识、改进意识和团队协作能力等都得到了很大的提高。

摘要： X蛋白生产工艺流程图X蛋白为糖修饰蛋白的一种,是我公司研发上市的重要的品种之一,公司较重视该产品的质量及产率.X蛋白经过QHP工艺优化后，层析高一步收率20%，折合原液产量提高30mg。制剂制备成品为5400支，直接经济效益达到100万。顺利达成了预期设定的目标。在实验实施和问题分析解决过程中，小组成员的个人能力、TQC知识、改进意识和团队协作能力等都得到了很大的提高。

摘要： X蛋白生产工艺流程图X蛋白为糖修饰蛋白的一种,是我公司研发上市的重要的品种之一,公司较重视该产品的质量及产率.X蛋白经过QHP工艺优化后，层析高一步收率20%，折合原液产量提高30mg。制剂制备成品为5400支，直接经济效益达到100万。顺利达成了预期设定的目标。在实验实施和问题分析解决过程中，小组成员的个人能力、TQC知识、改进意识和团队协作能力等都得到了很大的提高。

摘要： 本发明涉及阴离子交换树脂的制造方法、阴离子交换树脂、阳离子交换树脂的制造方法、阳离子交换树脂、混床树脂和电子部件和/或材料清洗用超纯水的制造方法。该阴离子交换树脂的制造方法包括下述(1-a)～(1-e)工序，该方法抑制了杂质的残存和分解物的产生，并且溶出物少。(1-a)工序：使单乙烯基芳香族单体和交联性芳香族单体共聚，得到交联共聚物；(1-b)工序：相对于1g交联共聚物，使特定的溶出性化合物的含量为400μg以下；(1-c)工序：对交联共聚物进行卤烷基化，将相对于单乙烯基芳香族单体为80摩尔％以下的卤烷基导入；(1-d)工序：从卤烷基化交联共聚物中除去特定的溶出性化合物；(1-e)工序：使卤烷基化交联共聚物与胺化合物反应。

摘要： 本发明提供一种含有配置于多孔性支撑体的细孔内且由下述通式(PI)或(PII)所表示的结构的苯乙烯‑丙烯酸共聚物构成的树脂的离子交换膜、用于形成该膜的组合物及其制造方法。R

摘要： 本发明的课题在于提供一种针对弯折等的机械强度优异、能够长期发挥稳定的电解性能的阳离子交换膜；使用该阳离子交换膜的电解槽；和阳离子交换膜的制造方法。本发明涉及阳离子交换膜(1)，其是至少具备膜主体和两个以上的增强芯材的阳离子交换膜，所述膜主体包含具有离子交换基的含氟类聚合物，所述增强芯材在所述膜主体的内部大致平行地配置，其中，所述膜主体在相邻的所述增强芯材(10)彼此之间形成了两个以上的溶出孔(12)，并且，在将相邻的所述增强芯材(10)彼此的距离设为a、将相邻的所述增强芯材(10)与所述溶出孔(12)的距离设为b、将相邻的所述溶出孔(12)彼此的距离设为c、将在相邻的所述增强芯材(10)彼此之间形成的溶出孔(12)的数量设为n时，至少存在满足下述式(1)或式(2)的关系的a、b、c以及n：b＞a/(n+1)···(1)，c＞a/(n+1)···(2)。

摘要： 阴离子交换体和阳离子交换体的混合物的生产方法，其特征在于包括阴离子交换体转换步骤(1)，其中使通过将二氧化碳气体溶解在纯化水或超纯水中而获得的二氧化碳水溶液与阴离子交换体(B)和阳离子交换体的混合物接触，从而将阴离子交换体(B)转换为具有碳酸氢根离子形式或具有碳酸氢根离子形式和碳酸根离子形式二者的阴离子交换体(A)，并获得阴离子交换体(A)和阳离子交换体的混合物。根据本发明，可将阴离子交换体和阳离子交换体的混合物的阴离子交换体在维持混合状态的同时转换为碳酸氢根离子形式、或碳酸氢根离子形式和碳酸根离子形式二者。

摘要： 一种离子交换膜，其具备：具有阳离子交换基、形成为片状的第一阳离子交换组合体；和以与第一阳离子交换组合体接触的方式配置、具有阴离子交换基、形成为片状的第一阴离子交换组合体。还具备：具有阳离子交换基、形成为片状、以与第一阳离子交换组合体对置的方式配置、比第一阳离子交换组合体更容易透过水的第二阳离子交换组合体；和具有阴离子交换基、形成为片状、以与第一阴离子交换组合体对置的方式配置、比第一阴离子交换组合体更容易透过水的第二阴离子交换组合体。

摘要： 本发明涉及阴离子交换树脂的制造方法、阴离子交换树脂、阳离子交换树脂的制造方法、阳离子交换树脂、混床树脂和电子部件和/或材料清洗用超纯水的制造方法。该阴离子交换树脂的制造方法包括下述(1－a)～(1－e)工序，该方法抑制了杂质的残存和分解物的产生，并且溶出物少。(1－a)工序：使单乙烯基芳香族单体和交联性芳香族单体共聚，得到交联共聚物；(1－b)工序：相对于1g交联共聚物，使特定的溶出性化合物的含量为400μg以下；(1－c)工序：对交联共聚物进行卤烷基化，将相对于单乙烯基芳香族单体为80摩尔％以下的卤烷基导入；(1－d)工序：从卤烷基化交联共聚物中除去特定的溶出性化合物；(1－e)工序：使卤烷基化交联共聚物与胺化合物反应。

摘要： 本发明提供一种含有配置于多孔性支撑体的细孔内且由下述通式(PI)或(PII)所表示的结构的苯乙烯-丙烯酸共聚物构成的树脂的离子交换膜、用于形成该膜的组合物及其制造方法。R

摘要： 本发明提供一种能够以比以往低的电压将碱金属氯化物水溶液电解、且能够降低阳极气体中所含有的杂质气体浓度的离子交换膜电解槽用阳极以及使用该离子交换膜电解槽用阳极的离子交换膜电解槽。离子交换膜电解槽用阳极是由离子交换膜划分成阳极室和阴极室的离子交换膜电解槽所使用的离子交换膜电解槽用阳极。离子交换膜电解槽用阳极具有至少1张金属制有孔平板(1)(网状金属板(1))，金属制有孔平板(1)(网状金属板(1))的厚度是0.1mm～0.5mm、短径SW与长径LW之比SW/LW是0.45～0.55。优选短径SW是3.0mm以下。

摘要： 本发明的课题在于提供一种针对弯折等的机械强度优异、能够长期发挥稳定的电解性能的阳离子交换膜；使用该阳离子交换膜的电解槽；和阳离子交换膜的制造方法。本发明涉及阳离子交换膜(1)，其是至少具备膜主体和2个以上的增强芯材的阳离子交换膜，所述膜主体包含具有离子交换基的含氟类聚合物，所述增强芯材在所述膜主体的内部大致平行地配置，其中，所述膜主体在相邻的所述增强芯材(10)彼此之间形成了2个以上的溶出孔(12)，并且，在将相邻的所述增强芯材(10)彼此的距离设为a、将相邻的所述增强芯材(10)与所述溶出孔(12)的距离设为b、将相邻的所述溶出孔(12)彼此的距离设为c、将在相邻的所述增强芯材(10)彼此之间形成的溶出孔(12)的数量设为n时，至少存在满足下述式(1)或式(2)的关系的a、b、c以及n。b＞a/(n+1)···(1)c＞a/(n+1)···(2)。

摘要： 本发明公开了单分散聚甲基丙烯酸酯离子交换层析介质在磺达肝癸钠柱层析纯化中的应用，采用单分散聚甲基丙烯酸酯离子交换层析介质为填料的色谱柱进行柱层析。本发明不但利于以水溶液做流动相分离纯化磺达肝癸钠粗品，达到高纯度和高回收率，而且柱层析不会随着盐浓度和流速的变化而发生变化，层析填料可耐高压和高流速，同时可使用低盐浓度将吸附在层析柱上的磺达肝癸钠洗脱下来。