MCF-7细胞

摘要： 背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚。目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制。方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRTPCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达。在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达。结果与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌干细胞的形成及干性相关标志物的表达。

摘要： 目的:探讨miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7凋亡的潜在分子机制。方法:通过高通量测序检测正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7中的差异miRNA。在乳腺癌细胞MCF7中过表达差异倍数大于7的miRNA,检测其凋亡水平。通过miRDB在线分析miRNA潜在的靶标基因。通过过表达或敲低miRNA和荧光素酶报告实验确定miRNA的靶标基因。结果:正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7的总miRNA高通量测序结果发现,MCF10A细胞中miRNA比乳腺癌细胞MCF7表达量大于7倍的有30种。过表达上述miRNA后,miR-134-5p增强了乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平(P0.05)。同时过表达miR-134-5p和MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平没有显著改变(P>0.05)。结论:miR-134-5p通过靶向MRPL58 mRNA的3端非编码区以降低MRPL58的翻译水平,最终促进了乳腺癌细胞MCF7的凋亡。

摘要： 目的探讨四氢姜黄素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡及转移的作用。方法采用CCK8和克隆形成试验测定四氢姜黄素对MCF-7细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测四氢姜黄素对MCF-7细胞凋亡的作用,细胞划痕试验、Transwell试验检测四氢姜黄素对MCF-7细胞转移、侵袭能力的影响,Western blot法检测四氢姜黄素对MCF-7细胞凋亡(Bcl-2、Bax)、转移相关蛋白(MMP2、MMP9)表达的调控作用。结果四氢姜黄素对MCF-7细胞增殖具有一定的抑制作用,可升高细胞凋亡率,降低其转移能力。结论四氢姜黄素作用机制可能是通过下调Bcl-2/Bax蛋白表达来诱导肿瘤细胞凋亡,以及下调基质金属蛋白酶2和9(MMP2,MMP9)表达来抑制细胞转移而实现的。

摘要： 目的:研究Angiomotin(Amot)基因沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响,初步评估Amot在乳腺癌中异常表达的分子机制。方法:运用免疫组化、Western blot及RT-qPCR技术在乳腺癌组织及乳腺癌细胞株中验证Amot的表达,进而运用RNA干扰技术特异性地阻断Amot在乳腺癌高表达细胞株MCF-7中的表达,以期了解Amot沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响。结果:114例乳腺癌组织中,97例阳性表达,阳性率达85.09%;92例非癌组织中,阳性表达10例,阳性率为10.87%,两组差异具有显著统计学意义(P<0.001)。Amot在乳腺癌组织中高表达,定位在细胞核和胞浆中,主要定位于细胞核;组织芯片癌旁组织中低表达。MCF-7细胞系经Amot沉默后,细胞形态学上发生上皮间质表型转化。Amot基因沉默后,乳腺癌MCF-7干细胞相关分子表型标志CD24/CD44双标阳性率的变化:CON组:CD24(11.1±0.55)%、CD44<(0.1±0.48)%;NC组:CD24(12.4±0.62)%、CD44<(0.08±0.7)%;KD组:CD24<(0.1±0.08)%、CD44(81.0±2.02)%。乳腺癌干细胞相关分子表型标志物CD24表达降低,CD44表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.001)。肿瘤球形成率:CON组2.6%,NC组2.8%,KD组9.75%;乳腺癌细胞在Amot沉默后形成“肿瘤球”能力增强,差异具有统计学意义(P<0.01)。干细胞特性相关基因C-myc、Sox-2表达增加;上皮蛋白E-cadherin表达减弱,间皮蛋白N-cadherin、Vimentin、a-SMA、Snail表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时发现,MCF-7细胞系经Amot沉默后,Hippo-YAP通路中YAP及YAP/TAZ表达降低,YAP上游LATS1表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Amot基因沉默增强乳腺癌干细胞特性,诱发乳腺癌细胞发生EMT。

摘要： 目的探究IGFBP-6对人乳腺癌MCF-7增殖的影响。方法收集经手术切除并经病理证实的乳腺癌组织标本80例及癌旁组织50例;体外培养乳腺癌细胞MCF-7;免疫组织化学法检测乳腺癌组织中IGFBP-6表达,将IGFBP-6质粒转染到MCF-7细胞中,MTT法观察上调IGFBP-6对MCF-7细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测乳腺癌细胞中IGFBP-6的表达水平。结果在乳腺癌组织中IGFBP-6 mRNA表达明显低于癌旁组织(P<0.05),上调IGFBP-6表达能够显著抑制MCF-7细胞的增殖能力。结论IGFBP-6可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。

摘要： 目的:探究莱菔硫烷(SFN)联合维生素D(VD)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,为预防和控制乳腺癌提供新的策略。方法:实验分为空白对照组、SFN组、VD组和SFN+VD组。人乳腺癌MCF-7细胞培养至对数生长期,倒置显微镜、细胞血球板计数、CCK-8法和流式细胞术分别观察、分析和检测对照组和处理组干预MCF-7细胞后的细胞形态、数量、细胞增殖活力和细胞凋亡情况。结果:倒置显微镜下可以观察到,MCF-7细胞数量随药物浓度增加而逐渐减少,细胞形态也逐渐皱缩。细胞血球板计数结果显示,随着SFN或VD浓度的上升,人乳腺癌MCF-7细胞的数目随之下降。CCK-8检测结果表明,SFN和VD均可抑制MCF-7细胞增殖能力,且随药物浓度的增加,这种抑制效果更加显著;SFN+VD与两类药物单独作用相比,其对MCF-7细胞增殖的抑制效果更加显著,当药物浓度为10μmol/L时,SFN组、VD组和SFN+VD组中的MCF-7细胞增殖活力分别为对照组的47.54%、43.38%和32.29%,差异有统计学意义(均P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,MCF-7细胞的凋亡比例随药物浓度的增加而显著上升,且SFN联合VD组最为显著。其中,对照组、10μmol/L的SFN组、VD组和SFN+VD处理组中的MCF-7细胞凋亡率分别为9.99%、33.51%、57.90%和90.83%,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:SFN联合VD能够加强对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用,并诱导乳腺癌细胞凋亡。

摘要： 目的:探索大蒜、洋葱的热性物质基础。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法考察大蒜、洋葱所含的12种硫醚类化合物对离体培养的MCF-7细胞生长增殖的影响,以确定其寒热属性。结果:在一定的浓度范围内,12种硫醚类化合物对体外培养的MCF-7细胞的生长增殖均表现为促进作用。结论:硫醚类化合物药性属热,是大蒜、洋葱显示热性的物质基础之一。

摘要： 目的:考察黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)对人乳腺癌细胞MCF-7自噬的影响,探讨其是否能增加顺铂(CDDP)化疗敏感性。方法:ASⅡ处理乳腺癌MCF-7细胞后,MTT检测细胞的活性;Western blot分析自噬蛋白LC3、p62的表达及凋亡蛋白裂解的Caspase-9和PRAP的表达;定量逆转录聚合酶链反应qRT-PCR法检测ASⅡ作用于MCF-7细胞后自噬相关基因LC3、p62 mRNA的表达水平。结果:ASⅡ作用于MCF-7细胞24 h和48 h后,分别在50μM和25μM以下对MCF-7细胞无明显毒性,细胞存活率大于95%;ASⅡ呈时间和浓度依赖性增加LC3Ⅱ、p62蛋白和mRNA水平;同时发现ASⅡ(50μM)增加LC3Ⅱ和p62蛋白的表达弱于氯喹(5μM);与单药CDDP相比,ASⅡ增加裂解的Caspase-9和PRAP蛋白的表达。结论:ASⅡ能抑制MCF-7细胞自噬的发生,并增加乳腺癌MCF-7细胞对CDDP的化疗敏感性。

摘要： 采用噻唑蓝(MTT)比色法考察了4种甲基吡嗪类化合物2,5-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪对离体培养的MCF-7细胞生长增殖的影响,以确定他们的寒热属性。结果表明:4种甲基吡嗪类化合物在一定浓度范围内对MCF-7生长增殖均具有促进作用。4种甲基吡嗪类化合物结构类似,寒热属性均为热性,存在一定的构-性关系;川芎嗪(2,3,5,6-四甲基吡嗪)是中药川芎的热性物质基础之一。

摘要： 目的研究赖氨酸甲基转移酶(SETD8)对乳腺癌MCF-7细胞转移的调控作用。方法用qRT-PCR和免疫组化实验检测癌旁正常组织和乳腺癌组织中SETD8表达。使用Lipofectamine 3000分别将小干扰RNA阴性对照(Control),SETD8的小干扰RNA(siRNA-1、siRNA-2组)转染到MCF-7细胞中,Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力。qRT-PCR检测SETD8、Slug、Zeb1、Zeb2、Twist1、Snail的mRNA表达量。Western blot检测SETD8和Slug的蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测H4K20me1修饰在Slug基因启动子上的富集情况。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中SETD8的mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与Control组比较,敲低组SETD8的mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.0001)。相比于Control组,细胞迁移、侵袭能力减弱,Slug蛋白表达水平降低。与IgG组比较,H4K20me1修饰能够显著富集在Slug基因启动子上游1500~2000 bp之间(P<0.001)。结论下调SETD8的表达能够抑制MCF-7细胞的转移能力,其机制可能与SETD8调控Slug基因转录相关。

摘要： 目的：分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,以人乳腺癌细胞MCF7为靶细胞,研究细胞毒作用.rn 方法：以新鲜毛蚶软体部分为原材料,经低温水提、硫酸铵分级沉淀获得毛蚶蛋白活性组分Ⅲ;进一步利用FPLC系统结合阴离子交换层析及凝胶柱层析法对其进行分离,获取毛蚶抗癌蛋白组分,命名NS;以人乳腺癌细胞MCF7为研究对象,倒置相差显微镜观察NS组分对癌细胞生长的影响,Giemsa染色观察NS组分对癌细胞及核形态的影响,流式细胞术测定NS组分作用MCF7细胞后对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测与细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.rn 结果：NS组分对人乳腺癌细胞MCF7生长具有一定的抑制作用;倒置相差显微镜下,NS组分作用MCF7细胞12h,部分细胞收缩变圆、脱落,24h、48h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞周期的影响,发现其主要引起细胞G2-M期阻滞;AnnexinV-PI双染结合流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞凋亡的影响,发现随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增大.Western blot检测发现NS组分作用MCF7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调.rn 结论：毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌细胞MCF7的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调.

摘要： 目的：分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,以人乳腺癌细胞MCF7为靶细胞,研究细胞毒作用.rn 方法：以新鲜毛蚶软体部分为原材料,经低温水提、硫酸铵分级沉淀获得毛蚶蛋白活性组分Ⅲ;进一步利用FPLC系统结合阴离子交换层析及凝胶柱层析法对其进行分离,获取毛蚶抗癌蛋白组分,命名NS;以人乳腺癌细胞MCF7为研究对象,倒置相差显微镜观察NS组分对癌细胞生长的影响,Giemsa染色观察NS组分对癌细胞及核形态的影响,流式细胞术测定NS组分作用MCF7细胞后对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测与细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.rn 结果：NS组分对人乳腺癌细胞MCF7生长具有一定的抑制作用;倒置相差显微镜下,NS组分作用MCF7细胞12h,部分细胞收缩变圆、脱落,24h、48h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞周期的影响,发现其主要引起细胞G2-M期阻滞;AnnexinV-PI双染结合流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞凋亡的影响,发现随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增大.Western blot检测发现NS组分作用MCF7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调.rn 结论：毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌细胞MCF7的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调.

摘要： 目的：分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,以人乳腺癌细胞MCF7为靶细胞,研究细胞毒作用.rn 方法：以新鲜毛蚶软体部分为原材料,经低温水提、硫酸铵分级沉淀获得毛蚶蛋白活性组分Ⅲ;进一步利用FPLC系统结合阴离子交换层析及凝胶柱层析法对其进行分离,获取毛蚶抗癌蛋白组分,命名NS;以人乳腺癌细胞MCF7为研究对象,倒置相差显微镜观察NS组分对癌细胞生长的影响,Giemsa染色观察NS组分对癌细胞及核形态的影响,流式细胞术测定NS组分作用MCF7细胞后对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测与细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.rn 结果：NS组分对人乳腺癌细胞MCF7生长具有一定的抑制作用;倒置相差显微镜下,NS组分作用MCF7细胞12h,部分细胞收缩变圆、脱落,24h、48h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞周期的影响,发现其主要引起细胞G2-M期阻滞;AnnexinV-PI双染结合流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞凋亡的影响,发现随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增大.Western blot检测发现NS组分作用MCF7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调.rn 结论：毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌细胞MCF7的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调.

摘要： 目的：分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,以人乳腺癌细胞MCF7为靶细胞,研究细胞毒作用.rn 方法：以新鲜毛蚶软体部分为原材料,经低温水提、硫酸铵分级沉淀获得毛蚶蛋白活性组分Ⅲ;进一步利用FPLC系统结合阴离子交换层析及凝胶柱层析法对其进行分离,获取毛蚶抗癌蛋白组分,命名NS;以人乳腺癌细胞MCF7为研究对象,倒置相差显微镜观察NS组分对癌细胞生长的影响,Giemsa染色观察NS组分对癌细胞及核形态的影响,流式细胞术测定NS组分作用MCF7细胞后对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测与细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.rn 结果：NS组分对人乳腺癌细胞MCF7生长具有一定的抑制作用;倒置相差显微镜下,NS组分作用MCF7细胞12h,部分细胞收缩变圆、脱落,24h、48h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞周期的影响,发现其主要引起细胞G2-M期阻滞;AnnexinV-PI双染结合流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞凋亡的影响,发现随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增大.Western blot检测发现NS组分作用MCF7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调.rn 结论：毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌细胞MCF7的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调.

摘要： 目的：分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,以人乳腺癌细胞MCF7为靶细胞,研究细胞毒作用.rn 方法：以新鲜毛蚶软体部分为原材料,经低温水提、硫酸铵分级沉淀获得毛蚶蛋白活性组分Ⅲ;进一步利用FPLC系统结合阴离子交换层析及凝胶柱层析法对其进行分离,获取毛蚶抗癌蛋白组分,命名NS;以人乳腺癌细胞MCF7为研究对象,倒置相差显微镜观察NS组分对癌细胞生长的影响,Giemsa染色观察NS组分对癌细胞及核形态的影响,流式细胞术测定NS组分作用MCF7细胞后对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测与细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.rn 结果：NS组分对人乳腺癌细胞MCF7生长具有一定的抑制作用;倒置相差显微镜下,NS组分作用MCF7细胞12h,部分细胞收缩变圆、脱落,24h、48h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞周期的影响,发现其主要引起细胞G2-M期阻滞;AnnexinV-PI双染结合流式细胞术检测NS组分对MCF7细胞凋亡的影响,发现随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增大.Western blot检测发现NS组分作用MCF7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调.rn 结论：毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌细胞MCF7的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调.

摘要： 目的：初步探讨纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能作用机制.方法：流式细胞术研究纳豆脂肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳研究纳豆脂肽对MCF-7细胞DNA损伤的影响;western blot蛋白免疫印迹法研究纳豆脂肽对雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达的影响.结果：纳豆脂肽可以诱导MCF-7细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,同时可以引起MCF-7细胞DNA损伤,改变MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达水平.结论：纳豆脂肽可能是通过影响MCF-7细胞体内雌激素受体表达水平和引起DNA损伤来诱导MCF-7细胞发生凋亡.

摘要： 目的：初步探讨纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能作用机制.方法：流式细胞术研究纳豆脂肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳研究纳豆脂肽对MCF-7细胞DNA损伤的影响;western blot蛋白免疫印迹法研究纳豆脂肽对雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达的影响.结果：纳豆脂肽可以诱导MCF-7细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,同时可以引起MCF-7细胞DNA损伤,改变MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达水平.结论：纳豆脂肽可能是通过影响MCF-7细胞体内雌激素受体表达水平和引起DNA损伤来诱导MCF-7细胞发生凋亡.

摘要： 目的：初步探讨纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能作用机制.方法：流式细胞术研究纳豆脂肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳研究纳豆脂肽对MCF-7细胞DNA损伤的影响;western blot蛋白免疫印迹法研究纳豆脂肽对雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达的影响.结果：纳豆脂肽可以诱导MCF-7细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,同时可以引起MCF-7细胞DNA损伤,改变MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达水平.结论：纳豆脂肽可能是通过影响MCF-7细胞体内雌激素受体表达水平和引起DNA损伤来诱导MCF-7细胞发生凋亡.

摘要： 目的：初步探讨纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能作用机制.方法：流式细胞术研究纳豆脂肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳研究纳豆脂肽对MCF-7细胞DNA损伤的影响;western blot蛋白免疫印迹法研究纳豆脂肽对雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达的影响.结果：纳豆脂肽可以诱导MCF-7细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,同时可以引起MCF-7细胞DNA损伤,改变MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达水平.结论：纳豆脂肽可能是通过影响MCF-7细胞体内雌激素受体表达水平和引起DNA损伤来诱导MCF-7细胞发生凋亡.

摘要： 目的：初步探讨纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能作用机制.方法：流式细胞术研究纳豆脂肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响;单细胞凝胶电泳研究纳豆脂肽对MCF-7细胞DNA损伤的影响;western blot蛋白免疫印迹法研究纳豆脂肽对雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达的影响.结果：纳豆脂肽可以诱导MCF-7细胞凋亡并将细胞周期阻滞在S期,同时可以引起MCF-7细胞DNA损伤,改变MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达水平.结论：纳豆脂肽可能是通过影响MCF-7细胞体内雌激素受体表达水平和引起DNA损伤来诱导MCF-7细胞发生凋亡.

摘要： 本发明公开了一种基于拉曼光谱检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞探针复合物及其制备方法。所述的探针复合物以和MCF-7细胞靶向作用的核酸适体为模板，通过光催化方法在其DNA链的碱基上沉积金和银的双金属合金纳米粒子，并在纳米粒子表面固载拉曼信号分子罗丹明6G（Rh6G）。透射电子显微镜照片显示探针复合物的结构为链状，并具有和MCF-7细胞靶向结合的能力。将MCF-7细胞和所述的探针复合物作用，其拉曼光谱出现罗丹明6G的特征吸收峰，能有效、灵敏及特异性的检测人乳腺癌MCF-7细胞。

摘要： 本发明公开了一种特异性靶向乳腺癌细胞株MCF‑7的核酸适配体筛选及其应用，核酸适配体的核苷酸序列是指如下序列所示的DNA片段：序列9‑A：5’‑AGGAGCACGACTCTGACGTAGGATCGAGACGAGGTACGTAT‑3’，是通过cell‑SELEX技术进行筛选，首先合成初始文库，以乳腺癌细胞株MCF‑7为靶细胞，与文库孵育，进行正筛选、洗脱、PCR扩增和单链DNA制备。本发明的核酸适配体进行乳腺癌细胞检测时，操作简洁方便、成本低、周期短、准确性高等优点，利用本发明的核酸适配体对其结合的靶分子进行研究，可以得到其肿瘤标志物，这对于乳腺癌的早期诊断、乳腺癌分型分析等方面应用提供了一种有效的工具和手段，可用于乳腺癌的早期诊断、制备乳腺癌诊断药物及试剂盒等。

摘要： 本发明公开了一种人乳腺癌细胞MCF‑7特异性检测方法。在电极表面进行PdAu纳米粒子功能化，在其上修饰对巯基苯硼酸能够识别MCF‑7细胞；制备苯硼酸/三联吡啶钌@二氧化硅纳米复合物探针，其中硼酸基能够特异性捕获细胞，形成一种类夹心结构，能够对MCF‑7细胞特异性识别，在共反应剂三丙胺存在下，产生电化学发光信号，PdAu纳米粒子的存在能够促进电化学发光发生，增加检测方法的灵敏度。

摘要： 本发明公开特异性识别和结合人乳腺癌细胞MCF‑7的DNA核酸适配体，核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:4中的任意一条或几条序列所示；或者在SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:4中的任意一条序列的基础上进行化学修饰、化学标记或碱基的改变。本发明还公开了核酸适配体或核苷酸序列在诊断试剂、分子影像探针或者靶向介质中的应用。本发明还涉及一种人乳腺癌检测和诊断试剂盒，在乳腺癌的检测、诊断和治疗中具有非常广阔的应用前景。本发明所涉及的核酸适配体具有亲和性高、特异性强、分子量小、稳定性好、合成简单、成本低、易修饰、无免疫原性等优点，可满足目前人乳腺癌快速诊断的要求。

摘要： 本发明公开了一种乳腺癌MCF‑7细胞干细胞悬浮球的培养方法,包括以下步骤：1）、收集对数生长期的人乳腺癌MCF‑7细胞，铺满75%～83%培养瓶，用0.25%质量分数的胰酶消化细胞至细胞变圆，倒弃胰酶；2）、加入用DMEM/H‑G完全培养液终止反应，用滴管吹打成为单细胞悬液，1000转/分钟离心，5分钟，弃上清，调整细胞浓度，按 1:3分瓶传代；3）、将传代后的MCF‑7细胞重悬于不含血清的DMEM/F‑12培养基，调整细胞的浓度为0.5×105 /mL，置于青霉素玻璃瓶中，盖紧瓶塞，制造缺氧环境，在37°C、5％CO2条件下培养，不置换培养基，待微球囊形成后，机械吹打为单细胞悬液，常规传代。本发明采用无氧培养法培养乳腺癌MCF‑7细胞干细胞悬浮球，培养的第二天即出现明显的悬浮生长的球形细胞团。

摘要： 本发明公开了一种基于拉曼光谱检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞探针复合物及其制备方法。所述的探针复合物以和MCF-7细胞靶向作用的核酸适体为模板，通过光催化方法在其DNA链的碱基上沉积金和银的双金属合金纳米粒子，并在纳米粒子表面固载拉曼信号分子罗丹明6G（Rh6G）。透射电子显微镜照片显示探针复合物的结构为链状，并具有和MCF-7细胞靶向结合的能力。将MCF-7细胞和所述的探针复合物作用，其拉曼光谱出现罗丹明6G的特征吸收峰，能有效、灵敏及特异性的检测人乳腺癌MCF-7细胞。

摘要： 本发明公开了一种检测MCF‑7细胞代谢物中脂肪酸类化合物的方法，对培养状态良好的MCF‑7细胞进行同步化处理，随后采用淬灭剂淬灭细胞，收集细胞；对收集到的细胞进行细胞破碎，获得细胞内源性物质；除去内源性物质中的蛋白质后，用石油醚、二氯甲烷或正己烷作为提取试剂提取得到MCF‑7细胞代谢物；采用气相色谱质谱联用法，检测MCF‑7细胞代谢物中的脂肪酸类化合物。本发明能够检测到多种MCF‑7细胞代谢物中的脂肪酸类化合物，对于细胞内脂肪酸代谢相关研究具有重要意义。

摘要： 本申请涉及一种基于MCF‑7细胞系构建的RARα效应物体外筛选方法，包括以下步骤：Step1，构建RARα表达载体；Step2，细胞转染；Step3，化合物暴露及报告基因检测。本申请利用离体的人源细胞作为宿主细胞，可以最大程度的反映外源化学品对人类健康的潜在内分泌干扰效应。并且，本申请的方法的灵敏度较高，激动剂AM580的EC50值为0.87nM，最小可观察效应浓度(LOEC)为0.1nM；拮抗剂Ro41‑5253的IC50值为2.67μM，LOEC值为0.625μM。

摘要： 本发明公开了一种特异性靶向乳腺癌细胞株MCF‑7的核酸适配体筛选及其应用，核酸适配体的核苷酸序列是指如下序列所示的DNA片段：序列9‑A：5’‑AGGAGCACGACTCTGACGTAGGATCGAGACGAGGTACGTAT‑3’，是通过cell‑SELEX技术进行筛选，首先合成初始文库，以乳腺癌细胞株MCF‑7为靶细胞，与文库孵育，进行正筛选、洗脱、PCR扩增和单链DNA制备。本发明的核酸适配体进行乳腺癌细胞检测时，操作简洁方便、成本低、周期短、准确性高等优点，利用本发明的核酸适配体对其结合的靶分子进行研究，可以得到其肿瘤标志物，这对于乳腺癌的早期诊断、乳腺癌分型分析等方面应用提供了一种有效的工具和手段，可用于乳腺癌的早期诊断、制备乳腺癌诊断药物及试剂盒等。

摘要： 本发明公开了一种乳腺癌MCF‑7细胞株匀速换液培养装置，包括箱体，所述箱体的内部放置有培养瓶和储液瓶，所述储液瓶上连通有出液管，且出液管的一端贯穿箱体并向外延伸，所述出液管上安装有阀门，所述培养瓶的上端盖设有安装盖，所述安装盖上塞设有第一活塞，所述第一活塞上插设有第一弯管、加料管和第二弯管，所述加料管的上端塞设有密封塞，所述储液瓶的上端塞设有第二活塞，所述第二活塞上插设有长管和短管，所述第二弯管的上端与长管的上端共同套设有连通软管，所述连通软管上安装有第一开关。本发明降低乳腺癌MCF‑7细胞株感染的几率，提高乳腺癌MCF‑7细胞株培养的成功率，实现更换乳腺癌MCF‑7细胞株培养液的自动化，降低实验人员的工作量。