荧光检测法

摘要： 采用超高效液相色谱-荧光检测法测定蟹苗孔雀石绿(Malachite Green,MG)、无色孔雀石绿(Leucomalachite Green,LMG)物质残留。样品经乙腈提取、硼氢化钾还原、离心及旋转蒸发,过中性氧化铝柱-PRS小柱串联装置,洗脱过微孔滤膜上机测定。无色孔雀石绿标准曲线范围为1.0~20.0 ng·mL^(-1),本方法检出限为0.50μg·kg^(-1),定量限均为1.60μg·kg^(-1),回收率在78.9%~101.0%,相对标准偏差为4.08%~9.39%。

摘要： 食品安全检测是保障食品安全的重要基础。食品中有害物质的快速检测对预防各种疾病、维护人体健康至关重要。相比较于国内传统的检测设备技术,荧光检测技术因其研制成本较低,操作简易便捷,检测效果灵敏,分析数据快速等多种优点被大量开发应用于食品安全检测分析领域。本文简要阐述了该技术的基本原理,并简要分析了该技术近几年来在食品安全检测中的应用情况,并对其存在的问题和未来前景进行了总结和展望。

摘要： 四环素(TC)是一种常用的广谱灭菌抗生素,在临床医学和畜牧业中有广泛应用.然而,滥用TC等抗生素会增加哺乳动物的肾毒性和细菌耐药性,严重威胁生态环境和人类健康.因此,构建灵敏、准确及快速的TC检测方法具有重要意义.本文综述了近年来基于纳米材料对TC的光学传感检测方法,重点讨论了基于荧光分析法检测TC的研究进展,并对TC光学传感器的发展方向进行了展望.

摘要： [背景]Calcein UltraGreenTM AM是一种新型荧光染料,用于标记和监测活细胞.[目的]基于该荧光染料的荧光特性及其在活细胞内的稳定特性,建立一种荧光定量快速检测活细菌总数的方法,并在实际样品中应用校正.[方法]通过应用荧光染料对细菌进行染色,再进行荧光强度检测,同时以平板计数法作平行对照,建立荧光强度值-活菌数标准曲线.[结果]确定了染色细菌的最佳pH值为8.0.该检测方法仅需固定染色温度,染色时间在20-30 min范围即可快速检测.建立了革兰氏阴性菌铜绿假单胞菌NY3、大肠杆菌和革兰氏阳性菌芽孢杆菌、红平红球菌FF、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的细菌总数与相对荧光强度值标准曲线.当菌悬液OD600值在0.01-0.30范围内时,上述6种细菌与荧光信号强度呈良好的线性关系(R2＞0.99).[结论]当样品菌悬液浓度范围控制在105-109 CFU/mL时,建立的荧光检测方法快速便捷,精密度、重复性、稳定性、回收率和准确度均较好,可应用于微生物实验、固体菌剂发酵、食品卫生与安全、环境检测等领域的活细菌总数现场快速检测.

摘要： 目的 建立超高效液相色谱-紫外检测法和超高效液相色谱-荧光检测法检测蜂蜜中百里香酚残留量的方法.方法 试样经水溶解定容后,由0.22μm滤膜过滤,经C18色谱柱分离,以乙腈-水(50:50,V:V)为流动相等度洗脱,流速0.25 mL/min,由液相色谱-紫外法和液相色谱-荧光法分别测定,外标法定量.结果 百里香酚在2.0～40.0 mg/kg的浓度范围内线性关系良好,紫外法和荧光法的定量限分别为2.0 mg/kg和0.2 mg/kg.在代表性洋槐蜜、油菜蜜、荆条蜜、枣花蜜和椴树蜜中,紫外法和荧光法添加回收率分别为93.6％～101.6％和97.9％～105.0％,相对标准偏差分别为0.3％～4.9％和0.2％～2.8％.结论 本方法具有操作简便、快速,准确度高的优点,适用于蜂蜜中百里香酚残留量的测定.

摘要： 生产石油时,确定其中硫的具体含量是控制产品质量的一项重要指标,其质量的好坏直接影响着机械发动机腐蚀性的快慢,也关系着环保工程.硫以及相关化合物的存在不仅使产品的化学稳定性降低、颜色变深,在运输和使用的过程中也会产生难闻的气味,沉渣的增多会极大的降低石油的品质,因此硫含量的测定分析工作极其重要.目前测定硫含量的方法有燃灯法、氧弹法、氧瓶燃烧法、微库仑法和荧光法等,其中荧光法又以X射线荧光分析法和紫外荧光法为主,荧光检测法操作非常方便、检测速度快且准确性高,最大限度的减轻了相关人员的工作量.

摘要： 有机污染物可长期残留于环境中,具有挥发性、半挥发性、生物蓄积性和高毒性等特点.而且可利用环境中的生物、水和大气进行迁移,严重危害了人类健康和赖以生存的环境,从而引起社会各界的广泛关注.荧光检测分析法灵敏度高且具有高选择性,分析简便、可重复性高、样品用量少、仪器设备简单,在环境有机污染物检测中极具应用潜力.本文综合概述了研究背景、荧光检测法以及在环境有机污染物中的检测研究.

摘要： 利用过氧化氢能够在氯化血红素的催化下将底物对羟基苯乙酸氧化成具有荧光的二聚体的性质,首次建立了柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定染发剂中过氧化氢的方法.优化了色谱分离条件和柱后衍生条件,结果表明,催化剂氯化血红素的浓度为8μmol·L-1,底物对羟基苯乙酸的浓度为80μmol·L-1,衍生化试剂的pH 10.5,衍生温度为35°C时衍生效率最高.在优化的条件下,过氧化氢的线性范围为0.005μmol/l～50μmol/l,样品的检测限为0.3 mg·kg-1,样品的加标回收率为98.2％～98.6％之间.该方法比现有的测定染发剂中过氧化氢具有抗干扰能力强,灵敏度高等显著优点.

摘要： 建立了一种利用高效液相色谱—荧光检测法测定水果和蔬菜中多菌灵残留量的方法.采用二氯甲烷对多菌灵残留进行提取,高效液相色谱梯度洗脱分离和测定,外标法定量.结果表明,在浓度为0～500μg/L的范围内,多菌灵的标准曲线具有良好的线性关系,相关系数r=0.9995,方法检出限为2μg/kg,加标回收率为85.86％～91.59％,测定的相对标准偏差均不超过5％.该方法简便易行,灵敏度高,准确性好,能满足常规检测工作中多菌灵残留量检测的需要.

摘要： 目的：建立辣椒酱中罗丹明B的高效液相色谱荧光检测法.方法：将样品中的罗丹明B用一定比例的丙酮和正己烷提取,经过氧化铝固相萃取柱净化浓缩后,用液相色谱荧光检测器检测其含量.结果：试验得出,罗丹明B在0.005～0.050mg/kg浓度范围内,线性关系良好,相关系数为0.999;方法的定量检测限为0.005mg/kg,平均回收率高.结论：该试验建立的方法快速、准确、灵敏度高,适用于辣椒酱中罗丹明B的测定.

摘要： 本文以建立药物C含量及有关物质检测的新方法为课题。结合目前含量及有关物经典方法，围绕HPLC不同检测器测原理，提出三种方案:HPLC-紫外检测法、HPLC-荧光检测法、HPLC-示差折光检测法。综合评定，采用HPLC-荧光检测法(柱后衍生)对药物C进行含量及有关物质的确定。从线性、精密度、重复性、准确性、稳定性试验结果可以得出，该方法可行有效，方法学验证成功。

摘要： 目的:建立一种高效液相色谱-荧光检测法检测给药大鼠早孕胚胎组织中苯并芘的方法,为后续临床研究提供更可靠依据. 方法:采用高效液相色谱-荧光检测法检测给药大鼠早孕胚胎组织中苯并芘(Bap)的浓度.样品用乙腈与流动相进行提取处理,使用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μ),流动相为甲醇/水(95∶5,v/v);荧光检测器的激发波长(Ex)为364nm,发射波长(Em)为427nm. 结果:苯并芘在0.002-0.5μg·mL-1范围内呈良好的线性范围,相关系数0.9999,本方法方法学回收率大于95％,日内精密度RSD为3.38％,日间精密度RSD为2.80％,稳定性(n=6)RSD为2.58％. 结论:本方法操作简便、准确度、灵敏度符合要求,样品前处理过程简单,可用于给药大鼠早孕胚胎组织中苯并芘的检测和研究.

摘要： 目的：建立了不同禽畜肉中四环素(TC)、土霉素(OTC)、金霉素(CTC)和强力霉素(DOTC)残留量的高效液相色谱荧光检测方法。方法：样品经5％HClO4除蛋白后，离心过滤。采用Watcrs XTerraRP18(5μm，4.6 ×150 mm)色谱柱，以甲醇-CaCl2缓冲液(pH6.6)=30：70(v/v)为流动相等度洗脱，流速：0.8 mL·min-1,柱温：30°C，经CaCl2缓冲液衍生化后，在激发波长(Zx)350 nm和发射波长(Zm)520 nm处检测四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的残留量。结果：四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的浓度均在0.24-1.20μg·mL-1(r=0.9990-0.9993)范围内与峰面积呈良好的线性关系(n=6)，平均加样回收率(n=9)分别为82.6％，84.8％，82.4％，83.5％。四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的最小检出限分别为2.88 ng·mL-1、2.69 ng·mL-1、3.03 ng·mL-1和3.36 ng·mL-1。结论：实验表明本方法快速、准确，重现性好，可用于检测禽畜肉类中四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的残留量。

摘要： 建立了鸡蛋中氨苄西林残留的高效液相色谱荧光法检测方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生后,以0.01mol·L-1的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL· min-1,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm.氨苄西林在5.0ng·mL-1～800ng·mL-1浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9994.当添加水平氨苄西林为为5～125 ng·g-1时,该方法平均回收率为78.30％～ 85.11％,相对标准偏差为4.99％～7.25％;日内相对标准偏差为7.99％～9.64％;日间相对标准偏差为8.69％～ 12.48％.氨苄西林检测限为0.4ng·g-1(S/N=3),定量限1.5ng·g-1(S/N=10).所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡蛋中氨苄西林残留的高灵敏度检测。

摘要： 吸烟有害健康。近年来，国内外烟草行业在卷烟产品降焦减害方面取得了较大的进展，卷烟烟气中有害成分的含量相对有了较大幅度的降低。但足以往采用的减害技术选择性不强，在去除有害成分的同时也部分减少了烟气致香成分，从而对卷烟原有风格口味产生一定影响。因此，开发新的选择性减害技术仍然是当前烟草行业减害研究的重点。本文把自行研制的深腔型杯芳烃材料加入到卷烟滤嘴中，制作成试验卷烟样，通过用HPLC-荧光检测法检测卷烟烟气中主要酚类物质，首次评价了杯芳烃材料用作卷烟滤嘴添加剂时对卷烟烟气中主要酚类化合物的滤除作用。

摘要： 蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一，在免疫识别，蛋白分泌，信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体，特别是对单克隆抗体药物，多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。单克隆抗体糖基化的变化可能会导致抗体溶解度、稳定性、清除率和免疫原性等的改变，并且会影响免疫因子的功能。因而建立抗体药物糖型准确、快速的分析方法对抗体药物的研发、仿制、生产、质控都具有重要的意义。本研究采用N糖分析试剂盒结合UPLC-FLR-MS对3个批次的曲妥珠单抗仿制药进行N糖分析，通过GU值数据库查询结合精确分子量比对进行糖型的鉴定。本研究中所建立的方法，具有所需样品量少、简单、快速、可靠等优点，并可用于其他多聚糖分析的研究。

摘要： 蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一，在免疫识别，蛋白分泌，信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体，特别是对单克隆抗体药物，多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。单克隆抗体糖基化的变化可能会导致抗体溶解度、稳定性、清除率和免疫原性等的改变，并且会影响免疫因子的功能。因而建立抗体药物糖型准确、快速的分析方法对抗体药物的研发、仿制、生产、质控都具有重要的意义。本研究采用N糖分析试剂盒结合UPLC-FLR-MS对3个批次的曲妥珠单抗仿制药进行N糖分析，通过GU值数据库查询结合精确分子量比对进行糖型的鉴定。本研究中所建立的方法，具有所需样品量少、简单、快速、可靠等优点，并可用于其他多聚糖分析的研究。

摘要： 蛋白质糖基化是生命系统非常重要的翻译后修饰之一，在免疫识别，蛋白分泌，信号转导等生命过程中发挥了重要作用。与蛋白相连的多聚糖是这些功能的重要载体，特别是对单克隆抗体药物，多聚糖部分对药物的生物活性有着重要的影响。单克隆抗体糖基化的变化可能会导致抗体溶解度、稳定性、清除率和免疫原性等的改变，并且会影响免疫因子的功能。因而建立抗体药物糖型准确、快速的分析方法对抗体药物的研发、仿制、生产、质控都具有重要的意义。本研究采用N糖分析试剂盒结合UPLC-FLR-MS对3个批次的曲妥珠单抗仿制药进行N糖分析，通过GU值数据库查询结合精确分子量比对进行糖型的鉴定。本研究中所建立的方法，具有所需样品量少、简单、快速、可靠等优点，并可用于其他多聚糖分析的研究。

摘要： 本发明涉及联用荧光底物和pH?敏感性荧光团(特别是4?甲基伞形酮(4?MU)和荧光素衍生物的组合)的生长培养基。该生长培养基用于通过结合有关pH?敏感性荧光团的荧光检测和有关受微生物激活的荧光底物的荧光检测进行微生物的荧光检测。

摘要： 本发明涉及联用荧光底物和pH-敏感性荧光团(特别是4-甲基伞形酮(4-MU)和荧光素衍生物的组合)的生长培养基。该生长培养基用于通过结合有关pH-敏感性荧光团的荧光检测和有关受微生物激活的荧光底物的荧光检测进行微生物的荧光检测。

摘要： 本发明提供了一种基于荧光免疫层析法的荧光曲线的检测方法与装置，该方法涉及荧光数据检测的技术领域，该方法包括：获取初步检测结果，其中，初步检测结果包括荧光曲线以及荧光曲线的配套信息；根据预设的规则及数据库，对荧光曲线进行有效性判断，得到判断结果；根据判断结果确定标识信息，将标识信息与荧光曲线关联保存至数据库；其中，数据库用于训练用于进行荧光曲线有效性判断及标识信息的确定的模型。本发明能够通过实时更新的数据库与特定的检验算法，自动区分荧光曲线的有效性、自动对荧光曲线进行分析、标识，进而提高对荧光曲线的检测效率与检测精度。

摘要： 本发明提供一种基于ARMS荧光PCR法检测基因多态性的通用型荧光发夹引物，所述引物的核苷酸序列如Seq？ID？No：1和2所示。本发明提供的检测引物与荧光引物价格低廉，所需要的其他实验耗材价格也廉价易得。在实验过程中不需测序，在节省了检测成本的同时，大大缩短了检测周期，提高了检测的效率。与Taqman探针法相比，本发明使用的是一对通用荧光引物，无需针对每个SNP位点去合成特异的荧光引物(探针)，具有更好的位点适应性。根据不同基因和基因型，只需要合成普通的PCR特异性扩增引物即可，大大降低研发成本。

摘要： 本发明属于荧光探针技术领域，提供一种基于荧光猝灭法快速检测桑色素的荧光探针及其制备方法和应用。以邻氯苯甲酸作为碳源和氯源，对苯二胺作为氮源，通过一步水热法快速制备氯氮双掺杂碳量子点ClNCQDs，离心除去不溶物，旋蒸去除乙醇溶剂，透析去除未反应的前体物质和小分子，冷冻干燥得到荧光探针ClNCQDs固体粉末。利用荧光检测法确定桑色素浓度与ClNCQDs荧光强度之间的线性关系，并将此线性方程用于实际样品中桑色素含量和加标回收率检测。本方法操作简便，抗干扰性强，检测成本低，可快速、高效、准确并定量检测实际样品中桑色素的含量。

摘要： 一种猫杯状病毒LAMP荧光检测组合物，由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、反向环引物LB与探针LF、LF‑Q组成，本发明还涉及一种猫杯状病毒LAMP荧光检测法，本发明提供的组合物可以进行LAMP荧光检测和试纸条双重检测，节约成本和时间。

摘要： 本发明涉及LAMP检测技术领域，尤其涉及一种LAMP荧光检测引物组合物以及LAMP荧光检测法，由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、反向环引物LB与探针LB1、LB‑Q组成，大大提升LAMP检测特异性，减少假阳；可以进行多重LAMP反应；荧光和胶体金可以同时检测，从而节约成本和时间；基于荧光检测，提升灵敏度。

摘要： 本发明涉及猫瘟病毒LAMP检测技术领域，尤其涉及一种猫瘟病毒LAMP荧光检测引物组合物及其LAMP荧光检测法。由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、反向环引物LB与探针LB‑Q、LF组成，本发明大大提升LAMP检测猫杯状病毒的特异性，减少假阳；可以进行多重LAMP反应；荧光和胶体金可以同时检测，从而节约成本和时间；基于荧光检测，提升灵敏度。

摘要： 本发明涉及支原体LAMP检测技术领域，尤其涉及一种支原体LAMP荧光检测引物组合物及其LAMP荧光检测法，其中一种支原体LAMP荧光检测引物组合物，由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3与探针LF、LF1、LF‑Q组成，本发明大大提升LAMP检测猫杯状病毒的特异性，减少假阳；可以进行多重LAMP反应；荧光和胶体金可以同时检测，从而节约成本和时间；基于荧光检测，提升灵敏度。

摘要： 本发明属于荧光探针技术领域，提供一种基于荧光猝灭法快速检测桑色素的荧光探针及其制备方法和应用。以邻氯苯甲酸作为碳源和氯源，对苯二胺作为氮源，通过一步水热法快速制备氯氮双掺杂碳量子点ClNCQDs，离心除去不溶物，旋蒸去除乙醇溶剂，透析去除未反应的前体物质和小分子，冷冻干燥得到荧光探针ClNCQDs固体粉末。利用荧光检测法确定桑色素浓度与ClNCQDs荧光强度之间的线性关系，并将此线性方程用于实际样品中桑色素含量和加标回收率检测。本方法操作简便，抗干扰性强，检测成本低，可快速、高效、准确并定量检测实际样品中桑色素的含量。